تعیین ماهیت ژنومی باکتریوفاژ لیتیک اختصاصی جداسازی شده علیه سالمونلا انتریتیدیس

  • سال انتشار: 1393
  • محل انتشار: اولین کنگره بین المللی و سیزدهمین کنگره ژنتیک ایران
  • کد COI اختصاصی: CIGS13_0917
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 1089
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

مصعب احمدی

گروه علوم طیور، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران

محمدامیر کریمی ترشیزی

گروه علوم طیور، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران

شعبان احمدی

گروه علوم طیور، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران

چکیده

اهداف: تنوع ژنتیکی باکتریوفاژها قابل ملاحظه میباشد و آنها میتوانندDNAیاRNA داشته باشند. در مطالعات قبلی، باکتریوفاژ لیتیک جدیدی جداسازی و کارایی آن در پیشگیری از بیماری سالمونلوز در طیور به اثبات رسید. هدف این مطالعه تعیین ماهیت ژنتیکی فاژجداسازی شده میباشد.مواد و روشها: استخراج ژنوم باکتریوفاژ با استفاده از فرمامید انجام شدEDTA(0.5 M, pH 8.0) ،Tris (2 M, pH8.5 فرمامید و فاژ به ترتیب به نسبت حجمی0/1و0/05و1و1مخلوط شدند و این سوسپانسیون به مدت 30 دقیقه در دمایدرجه سانتیگراد37 انکوبه شد. سپس ژنوم فاژبا استفاده از آب دو بار تقطیر و اتانول به نسبت 1 به 6 رسوب داده و به مدت 1 ساعت در دمایoC-20 نگهداری شد. با سانتریفیوژنمودن میکروتیوب حاوی این سوسپانسیون به مدت 5 دقیقه درrpm5000 ، پلیت ژنومی فاژ جمع آوری شد. محلول رونشست دور ریخته شد و میکروتیوبها به صورت در باز به مدت 5 دقیقه در دمای اتاق قرار گرفتند. پلیت ژنومی فاژ با استفاده از اتانول 70 درصد دو بارشسته و در 300 میکرولیتر بافرTEحل شد. با استفاده ازDNase I و ribonuclease Aنوکلئیک اسید جداسازی شده فاژ طبق دستورالعمل شرکت سینا کلون هضم شد. محصول هضم آنزیمی نوکلئیک اسید جداسازی شده فاژ با استفاده از ژل آگاروز 1 درصد الکتروفورز شد. نتایج: روش جداسازی ژنوم فاژ استفاده شده در این پژوهش، قابلیت استخراج مقدار کافی ژنوم قابل رویت ر ا بر ژل آگاروز داشت

کلیدواژه ها

باکتریوفاژ، سالمونلا انتریتیدیس، تعیین ماهیت ژنومی ویروس

مقالات مرتبط جدید

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.