همسانهسازی و بیان پروکاریوتی ژنchit42 حاوی ChBD در انتهای کربوکسیلی

  • سال انتشار: 1393
  • محل انتشار: اولین کنگره بین المللی و سیزدهمین کنگره ژنتیک ایران
  • کد COI اختصاصی: CIGS13_0625
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 685
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

نرگس اردستانی

پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

مصطفی مطلبی

پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

محمدرضا زمانی

پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

زهرا مقدسی جهرمی

پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

چکیده

آنزیمهای کیتیناز با هیدرولیز اتصالاتN-acetylglucoseamineدر پلیمر تشکیلدهنده زنجیرههای کیتین موجود در دیواره سلولی قارچ های پاتوژن، به مبارزه با این عوامل بیماریزا میپردازند. قارچ ریکودرما، بهدلیل ترشح انواعی از آنزیمهای کیتینازی، بهعنوان عاملی قوی درکنترل بیولوژیک بیماریهای قارچی مورد استفاده قرار میگیرد. این تحقیق بهمنظور بررسی اثرات ضدقارچی آنزیم کیتیناز 42 با منشأقارچTrichoderma atrovirideحاویChBDبا منشأRhizopusدر انتهای کربوکسیلی آن، انجام گرفته است. بدین منظور ابتدا این ژن با آغازگرهای اختصاصی حاوی جایگاههای آنزیمی متناسب برای همسانهسازی در ناقل بیانیpET26b(+) تکثیر شد. سپس در ناقل pJETهمسانهسازی گردید. در ادامه به روش هضم آنزیمی از این ناقل جدا گردیده و در ناقل بیانیpET26b(+) همسانهسازی شد.سازه بهدست آمده، توسط الگویPCRهضم آنزیمی و تعیین توالی مورد تأیید قرار گرفت که در هر سه روش حضور ژن کایمرکیتیناز42 به طول 1431 جفتباز تأیید شد. در ادامه این سازه به میزبانBL21-DE3 منتقل شده و شرایط بیانی در این میزبان پروکاریوتی بهینه سازی گردید. آنزیم کایمر در شرایط بهینه تولید شده و آماده ارزیابی علیه قارچهای بیماریزا می باشد.

کلیدواژه ها

کیتیناز42وTrichoderma atroviride ، Rhizopus ، ChBDوهمسانهسازی

مقالات مرتبط جدید

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.