تخلیص آنزیم لیپواکسیژنازدانه کنجد با استفاده از کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون و تعویض یونی

سال انتشار: 1393
محل انتشار: سومین همایش ملی فن آوری های نوین شیمی و مهندسی شیمی
کد COI اختصاصی: NCTCC03_181
زبان مقاله: فارسی
تعداد مشاهده: 975

نویسندگان

دانشجوی کارشناسی ارشد، رشته بیوشیمی، گروه شیمی، دانشکده علوم، دانشگاه فردوسی مشهد

دانشیار، دکترای بیوشیمی، گروه شیمی، دانشکده علوم، دانشگاه فردوسی مشهد

چکیده

دانه کنجد منبع غنی از آنزیم لیپواکسیژناز (LOX) محسوب می شود. در این مطالعه، به جداسازی و تخلیص آنزیم لیپواکسیژناز از دانه کنجد پرداخته شد. آنزیم های تولید شده با استفاده از روش های رسوب دهی با سولفات آمونیوم، کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون سفادکس G100 و کروماتوگرافی تعویض یونی Q- سفاروز خالص گردید. روند خالص سازی آنزیم با کمک ژل الکتروفورز SDS-PAGE بررسی شد. غلظت پروتئین فرکشن های خروجی از ستون کروماتوگرافی اندازه گیری شد و فعالیت آنزیمی نمونه های خالص شده بر پراکسیداسیون سوبسترای لینولئیک اسید در طول موج 660 نانومتر با استفاده متیل بلوسنجیده شد. فعالیت آنزیم لیپواکسیژناز در محدوده 9-3 pH اندازه گیری شد. بر اساس نتایج بدست آمده فرکشن 11 (0/3 مولار NaCl) دارای حداکثر فعالیت آنزیمی بود. وزن مولکولی آنزیم خالص شده بر اساس SDS-PAGE بیش از 70 کیلو دالتون برآورد گردید. آنالیز فعالیت آنزیم نشان داد که pH بهینه آنزیم 7 است. فعالیت آنزیم در محدوده pH های اسیدی و قلیایی کاهش یافته است همچنین، اثر یون دوظرفیتی آهن (Fe(2+) بر افزایش فعالیت آنزیم با توجه به کاهش جذب در طول موج 660 نانومتر مشاهده گردید، در حالیکه فعالیت آنزیم لیپواکسیژناز در حضور کاتیون آهن (Fe(3+) کاهش یافت.

کلیدواژه ها

دانه کنجد، آنزیم لیپواکسیژناز، کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون، کروماتوگرافی تعویض یونی، کاتیون آهن

مقالات مرتبط جدید

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.