کالیبراسیون دستگاه ترموسایکلر جهت بررسی تنوع ژنتیکی گیاه مامیران (Chelidonium majus)با استفاده ار مارکر مولکولی ISSR

  • سال انتشار: 1392
  • محل انتشار: اولین همایش سراسری کشاورزی و منابع طبیعی پایدار
  • کد COI اختصاصی: NACONF01_0977
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 744
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

رجا قلی نژاد بربری

دانشجوی کارشناسی ارشد زیست گیاهی دانشگاه پیام نور ساری

سید کمال کاظمی تبار

دانشیار دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری

عباس قلی پور

استادیار دانشگاه پیام نور ساری

چکیده

امروزه از نشانگرهای مولکولی در سطح وسیعی استفاده میشود. این تکنیک ها عمدتاً برای نقشه یابی ژنی، تشخیص ژنوتیپ های مطلوب، مطالعات تکوینی و فیلوژنتیک در گیاهان بکار برده می شوند. در این راستا پس از استخراج DNA از گیاه، نیازمند یک روش مناسب جهت تکثیر توالی قطعات DNA می باشد. چندشکلی تکثیر اختصاصی DNA (ISSR) یک روش ساده و قابل اعتماد برای تشخیص پلی مورفیسم DNA است و بطور گسترده ای در مطالعات تنوع ژنتیکی با استفاده از آغازگرهای بلند بکار گرفته میشود. در پژوهش حاضر که برای اولین بار در ایران صورت پذیرفت، واکنش ISSR و شرایط بهینه سازی چرخه دمایی برای تولید قطعات تکثیر ISSR از گیاه مامیران (Chelidonium majus) مورد بررسی قرار گرفت. برای تعیین شرایط بهینه، غلظت های مختلف MgCl2،DNA الگو، آنزیم Taq پلیمراز،پرایمر،dNTPs و همچنین برنامه های مختلف چرخه دمایی مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. با توجه به نتایج حاصله بهترین الگوهای باندی تجدیدپذیر با استفاده از 94/. میکرولیتر از پرایمر،MgCl2 به مقدار 7/. میکرولیتر،2 میکرولیتر از DNA الگو،37/. میکرولیتر dNTPs و 2/. میکرولیتر Taq پلیمراز، که به حجم 12/5 میکرولیتر می رسانده شده بودند بدست آمد. از 5 آغازگر استفاده شده، 3 آغازگر ISSR-8،و ISSR-14 و ISSR-2 پلیمورفیسم را به صورت باندهای واضح نشان دادند. در نهایت با توجه به نتایج حاصل، واکنش ISSR -PCR بهینه سازی شده را میتوان در تجزیه و تحلیل تنوع ژنتیکی گیاه مامیران مورد استفاده قرار داد.

کلیدواژه ها

تنوع ژنتیکی، نشانگر مولکولی ISSR ،مامیران

مقالات مرتبط جدید

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.