جهش زایی هدف دار در لوپ ۶ سوپر اکسید دیسموتاز ۱ انسانی به منظور بررسی خصوصیات آنزیم جهش یافته
- سال انتشار: 1399
- محل انتشار: بیست و یکمین کنگره ملی و نهمین کنگره بین المللی زیست شناسی ایران
- کد COI اختصاصی: BIOCONF21_0435
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 234
نویسندگان
گروه زیست سلولی و مولکولی، دانشکده علوم پایه ، دانشگاه مازندران ، بابلسر، ایران
گروه زیست سلولی و مولکولی، دانشکده علوم پایه ، دانشگاه مازندران ، بابلسر، ایران
گروه زیست سلولی و مولکولی، دانشکده علوم پایه ، دانشگاه مازندران ، بابلسر، ایران
گروه بیوشیمی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
چکیده
سوپر اکسید دیسموتاز۱ انسانی (hSOD۱) یک آنزیم آنتی اکسیدانی است که رادیکال سوپر اکسید را به هیدروژن پراکسید و اکسیژن تبدیل می کند. بیش از ۱۰۰ جهش در این آنزیم یافت شده ا ست که باعث بیماری ا سکلروز جانبی آمیوتروفیک (ALS) می شوند. هدف از این پژوهش برر سی تاثیر جهش L۱۰۶V واقع در لوپ سوپر اکسید دیسموتاز بر ساختار و فعالیت آن می باشد. از ژن سوپر اکسید دیسموتاز موجود در پلاسمید pET-۲۸a(+) به عنوان الگو برای جهش زایی هدف دار با روش Quick-change PCR استفاده شد. پس از تایید جهش ، پلاسمید حاوی جهش به باکتری بیانی E.coli سویه ی BL۲۱(DE۳) انتقال داده شد . برای بیان پروتئین از القا کننده های IPTG و لاکتوز استفاده شد . خالص سازی پروتئین به روش کروماتوگرافی تمایلی نیکل-سفارز انجام شد و برای تعیین خلوص پروتئین از ژل SDS_PAGE استفاده شد. تعیین فعالیت ویژه آنزیم جهش یافته و وحشی با استفاده از سوبسترای پیروگال ول در طول موج ۴۲۰ نانومتر با روش اسپکتروفتومتری انجام شد. مطالعات ساختاری با کمک تکنیکهای فلورسانس ذاتی وفلور سانس خارجی با ن شانگر ANS انجام شد. نتایج حا صل از این مطالعه ن شان می دهد که فعالیت ویژه آنزیم وح شی و جهش یافته L۱۰۶V به ترتیب ۷۰۳۱/۲۵ U/mg و۷۲۳۸/۶۵ /mg است. مطالعات ساختاری با فلور سانس ذاتی نشان داد که شدت نشر فلور سانس ذاتی جهش یافته L۱۰۶V به طور جزئی کمتر از حالت وحشی است. افزایش شدت نشر فلورسانس خارجی در جهش یافته ی L۱۰۶V نسبت به حالت وحشی بیانگر دسترسی بیشتر پاکت های سطحی هیدروفوب به ANS می با شد. بنابراین جهش L۱۰۶V در ژن سوپراک سید دی سموتاز به عنوان عامل ژنتیکی مرتبط به شکل ارثی اسکلروز جانبی آمیوتروفیک می باشد.کلیدواژه ها
آنزیم جهش یافته ی L۱۰۶V ، کروماتوگرافی تمایلی ، فلورسانس ذاتی و خارجی، اسکلروز جانبی آمیوتروفیکمقالات مرتبط جدید
- نقش طب آیورودا، صابون های درمانی و روغن های گیاهی در سلامت و آرامش گردشگریسلامت و توریسم درمانی"
- اثر ارتفاع بر برخی از خصوصیات مورفولوژیکی harmala Peganum و تنوع ژنوتیپی در ۳ منطقه از استان مازندران
- تهیه و کاربرد نانوذرات نقره دوپ شده با هیدروکسیآپاتیت مشتق شده از استخوان مرغ در کاهش رنگ متیلن بلوMB
- بررسی اثر ترکیب هورمونی، شرایط نوری و نوع ریسنمونه بر کبلوسزایی گیبه دارویی گسنهUrtica dioica L
- تاثیر تنش شوری وبرخی بهبود دهنده ها بر محتوای فلاوونوئیدی و آنتوسیانینی گیاه کاملینا
اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.