حذف دو توسپوویروس مهم پژمردگی لکه ای گوجه فرنگی (TSWV) و نکروز نقطه ای گل حنا (INSV) از گیاه زینتی آلسترومریا با استفاده از روش کشت بافت
عنوان مقاله: حذف دو توسپوویروس مهم پژمردگی لکه ای گوجه فرنگی (TSWV) و نکروز نقطه ای گل حنا (INSV) از گیاه زینتی آلسترومریا با استفاده از روش کشت بافت
شناسه ملی مقاله: R-1056161
منتشر شده در سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی در سال 1392
شناسه ملی مقاله: R-1056161
منتشر شده در سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی در سال 1392
مشخصات نویسندگان مقاله:
تبسم قطبی
علی اکبر حبشی
سحر وحیدحسن نیا
خلاصه مقاله:
تبسم قطبی
علی اکبر حبشی
سحر وحیدحسن نیا
آلسترومریا (Alstroemeria spp.) که یکی از10 گیاه زینتی مهم شاخه بریده در ایران و جهان است، از میزبان های حساس به توسپوویروس های پژمردگی لکه ای گوجه فرنگی (Tomato spotted wilt virus-TSWV) و ویروس نکروز نقطه ای گل حنا(Impatiens necrotic spot virus-INSV) می باشد. به منظور حذف ویروس های مهم بیماریزای TSWV و INSV از برخی ارقام مهم گیاه زینتی آلسترومریا و تولید گیاهچه های سالم و عاری از این ویروس ها، در سالهای 1389-90 از گلخانه های کشت و پرورش آلسترومریا از 5 رقم مهمWhite Queen، Sacromenta، Tampa، Balance، Sambura از استان تهران از هر رقم 2 گلدان در گلخانه تحقیقاتی جهت انجام کشت بافت و تهیه گیاه عاری از ویروس مستقر گردید و در آزمون سرولوژیکی DAS-ELISAبا استفاده از آنتی سرم های چندهمسانه ای اختصاصی ویروس های TSWV و INSV ساخت شرکت Bioreba سوییس نسبت به آلودگی به این دو ویروس مورد بررسی قرار گرفتند. نمونه های مثبت در آزمون سرولوژیکی الایزا روی گیاهان محک مناسب مایه زنی شدند. نتایج مطالعه دامنه میزبانی موید نتایج آزمون سرولوژیکی بود. آلودگی این نمونه ها به ویروس های TSWV و INSV، بکمک آزمون RT-PCR جفت پرایمرهای طراحی شده برای ژن نوکلیوپروتیین این دو ویروس مورد تایید قرار گرفت. برای ایجاد گیاه آلسترومریای عاری از این دو ویروس، جوانه های ریزوم آلسترومریا به طول 3 سانتی متر از گیاهان گلدانی مستقر در گلخانه که در آزمون الایزا مثبت شده بودند، جداسازی و پس از گندزدایی سطحی، قطعات0/7 - 1 میلیمتری از گره جوانه های جانبی یا انتهایی ریزوم در محیط کشت MS حاوی 0/5 میلی گرم در میلی لیتر BAP و 0/2 میلی گرم در میلی لیتر NAA منتقل گردید. نمونه ها پس از قرار گرفتن در محیط کشت درون بشقابک کشت، در شرایط دمایی 21 درجه سانتی گراد با دوره نوری روزانه 16 ساعت در اتاقک رشد (ژرمیناتور) نگهداری و پس از 12 هفته گیاهچه های حاصله به گلدانهای استریل در گلخانه منتقل شد. در نهایت عدم آلودگی گیاهچه ها به توسپوویروس های TSWV و INSV، از طریق آزمون سرولوژیک DAS-ELISA و آزمون مولکولی RT-PCR بررسی و تایید گردید. این نخستین گزارش از ایجاد گیاه آلسترومریا عاری از ویروس به روش ریزازدیادی در کشور می باشد. کلمات کلیدی: آلسترومریا، کشت بافت، عاری از ویروس، توسپوویروس، الایزا، TSWV، INSV
صفحه اختصاصی مقاله و دریافت فایل کامل: https://civilica.com/doc/1056161/