واکنش گیاهان تراریخت برنج حاوی ژنEPSPS به علفکش گلایفوسیت

یکی از موثرترین راه های ایجاد گیاهان مقاوم به علفکش گلایفوسیت، دستورزی ژن کد کننده آنزیم EPSPS به منظور کاهش میل ترکیبی گلایفوسیت به این آنزیم است. EPSPS از آنزیم های مسیر شیکیمات بوده که مسیول ساخت اسیدهای آمینه حلقوی و نیز انواع متابولیت های ثانویه در گیاهان و باکتری ها است. بدون حضور آنزیم فوق، موجود قادر به ادامه حیات نخواهد بود. در تحقیق حاضر یکی ازدومین های مهم جهت اتصال آنزیم EPSPS که اسیدآمینه گلایسین 96 است، به روش جهش زایی نقطه ای به واسطه مگاپرایمر در تک تیوپ از واکنش PCR به اسیدآمینه آلانین تغییر داده شد. ژن تغییر یافته (EPSPS)، به همراه ژن تیپ وحشی (35S:EPSPS) جداگانه در وکتور بیانی pPZPY122 کلون و به واسطه سویه سوپربیماری زای EHA105 از Agrobacterium tumefaciens به جنین بالغ گیاه برنج (Oryza sativa L.)در رقم هاشمی به روش in planta انتقال یافتند. تایید مولکولی تراریزش در دو نسل از گیاهان برنج به روش PCR انجام شد. همچنین تایید فنوتیپی بر اساس مقاومت به آنتیبیوتیک جنتامایسین و نیز مقاومت به علفکش گلایفوسیت در غلظت های مختلف انجام شد. در نهایت بررسی مقدار بیان ژنهای انتقال یافته در نسل دوم به واسطه Quantitative PCR انجام شد. نتایج نشان دهنده بیان هر دو ژن در گیاهان مورد آزمایش بود. در این مطالعه مشخص شد که فرابیان ژن موتانت سبب تولید گیاهان با مقاومت بالاتر به علفکش در مقایسه با گیاهان شاهد غیرموتانت و همچنین گیاهان با فرابیان ژن وحشی شده است.

کلیدواژه ها:

بیان ژن ، برنج ، گلایفوسیت ، تراریزش ، in planta ،