ایجاد پروتکل تکثیر نیمه انبوه ارقام عاری از ویروس هلو

اغلب باغات هلو در کشور با مشکل جدی بیماری های ویروسی مواجه هستند و بنابراین برای کاهش آلودگی بایستی نسبت به ایجاد هسته اولیه سالم عاری از ویروس اقدام گردد. هدف این پروژه سالم سازی ارقام هلو (آلبرتا، ردتاب، دیکسی و حاج کاظمی) از دو ویروس Plum Pox Vius (PPV) وPrunus Necrotic Ringspot Virus (PNRSV)از طریق گرما درمانی همراه با کشت مریستم و کشت ریزنمونه های تک گره و ایجاد و تکثیر هسته اولیه بود. پس از تولید گیاهان سالم و تایید سلامت آن ها با کمک تست های الیزا، نسبت به بهینه سازی پروتکل ریزازدیادی آن ها اقدام شد و در نهایت از هر رقم تعدادی گیاه کشت بافتی سالم تولید و در اختیار گذاشته شد. در مرحله اول نسبت به استقرار و پس از پایان دوره گرما درمانی، مریستم های انتهایی و جانبی برداشته شده و در محیط مناسب MS به همراه 5/0 میلی گرم در لیتر IBA جهت رشد کشت داده شد و سپس جهت مرحله شاخه زایی و ریشه زایی آزمایش های مختلفی انجام گردید. در مرحله استقرار با توجه به اینکه هلو به میزان آهن و نوع آن حساسیت بالایی دارد آزمایشی به صورت فاکتوریل در قالب طرح کامل تصادفی انجام گردید. در تمامی صفات بین تیمار شاهد و تیمارهای آهن اختلاف معنی داری مشاهده شد که با افزایش سطح آهن طول شاخه، تعداد شاخه و تعداد برگ هم افزایش یافت. بیشترین مقدار در تمامی صفات مربوط به 30 میلی گرم در لیتر تیمار آهن بود. همچنین براساس نتایج آزمایشات بعدی، با افزایش سطوح GA3 و BAP طول شاخه، تعدادشاخه و تعداد برگ هم افزایش یافت و بیشترین مقدار در تمامی صفات مربوط 2 میلی گرم در لیتر GA3 و 2 میلی گرم در لیتر BAP بود. در بررسی تاثیر سطوح مختلف هورمونی (GA3 و TDZ)، نتایج نشان داد که در بین صفات بیشترین میزان طول شاخه، تعداد شاخه و تعداد برگ مربوط به 2 میلی گرم در لیتر GA3 و 5/1 میلی گرم در لیتر TDZ بود. در مرحله ریشه زایی با تیمارهای مختلف هورمونی، نتایج نشان داد که بالاترین درصد ریشه زایی 90 درصد بود که به محیط کشت ½ MSحاوی 5/0 و 1 میلی گرم بر لیتر IBA تعلق داشت. این نمونه ها قبل از ورود به محیط ریشه زایی به مدت 7 روز در تایکی و در محیط کشت MS بدون هورمون قرار گرفته بودند. تست های الیزا و آر تی پی سی آرنیز نشان داد که دو رقم آلبرتا و حاجی کاظمی در درون شیشه و در گلدانها از دو ویروس مهم هلو یعنی PPV و PNRSV عاری می باشند.