بررسی پایداری بیان برخی ژن های مرجع به روش Real-Time PCR تحت تنش زیستی در گیاه برنج
- سال انتشار: 1398
- محل انتشار: فصلنامه بیوتکنولوژی کشاورزی، دوره: 11، شماره: 3
- کد COI اختصاصی: JR_JOAGK-11-3_002
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 892
نویسندگان
بخش تحقیقات علوم زراعی و باغی، مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی و منابع طبیعی استان مازندران، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی،
استادیار گروه مهندسی ژنتیک و بیولوژی، پژوهشکده ژنتیک و زیست فناوری کشاورزی طبرستان، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری
مربی پژوهش معاونت مازندران، موسسه تحقیقات برنج کشور، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، آمل، ایران
چکیده
هدف: در پژوهشهای بیان ژن با استفاده از Real-time PCR که ابزار قدرتمندی برای تجزیه و تحلیل سازوکارهای مقاومت به تنشهای زیستی در گیاهان است، انتخاب و اعتبارسنجی ژنهای مرجع بهمنظور بهینه کردن بیان ژنها بسیار مهم میباشد. این تحقیق با هدف بررسی کارایی و انتخاب ژنهای مرجع مناسب برای بهینهسازی اطلاعات حاصل از PCR زمان واقعی در گیاه برنج تحت تنش زیستی انجام شد. مواد و روشها: بدین منظور، هشت ژن کنترل داخلی شاملUBQ5 ،eIF4A ، Actin11، Actin1، UBC، Cylophilin، 18SrRNA و GAPDH بررسی شد. تنش زیستی در بافت برگی گیاهچههای 28 روزه رقم فجر و در حضور عامل بیماری قارچی Rhizoctonia solani RBL1، سیلیکات پتاسیم بهعنوان القاءکننده مقاومت، جدایههایPseudomonas با خاصیت آنتاگونیستی و القاءکنندگی و در سه دوره زمانی (6، 24 و 72 ساعت) اعمال شد. نتایج: بررسی پایداری بیان ژنهای مرجع با استفاده از نرمافزار BestKeeper نشان داد؛ که ژن UBC از پایداری بیان بیشتری نسبت به سایر ژنهای مورد بررسی در شرایط تنش زیستی در نمونه بافت برگی گیاه برنج برخوردار بوده و بر اساس آماره توصیفی ژنهای UBC و Actin11 دارای بیشترین همبستگی (97/0) با شاخص BestKeeper بودند. همچنین، ژنهای UBC و Actin11 دارای بیشترین پایداری (کمترین ضریب تغییرات) بودند. بر اساس تجزیه و تحلیل دادهها با استفاده از نرمافزار NormFinder نیز ژنهای Actin11 و eIF4a (بهترتیب 356/0 و 567/0) بیشترین میزان پایداری را نشان دادند. نتیجهگیری کلی: بررسی بیان ژن های مرجع با استفاده از میانگین هندسی ژنهای UBC و Actin11 در مقایسه با ژن Actin1 نشاندهنده ضرورت انتخاب مناسب ژن مرجع میباشد. نتایج این تحقیق نشان میدهد که ژنهای UBC و Actin11 ژنهای مرجع مناسبی برای بهینهسازی دادههای بیان ژن بهوسیله تجزیه و تحلیل Real-Time PCR در گیاه برنج میباشند.کلیدواژه ها
القاء کننده, برنج, بیان ژن, ژن مرجع, R. solaniاطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.