جستجوی آلودگی شیر با سالمونلا به روش تکثیر ژن invA

هدف: شیر به عنوان یک منبع غذایی غنی نقش عمده ای در تغذیه انسان دارد و نیز محیط مناسبی برای رشد و تکثیر میکروارگانیسم ها فراهم می کند. از جمله این میکروارگانیسم ها سالمونلاست که باعث مسمومیت غذایی و گاستروانتریت می شود. از این رو کنترل میکروبی شیر حائز اهمیت فراوان است . اگرچه آلودگی سالمونلایی به روش کشت یا سایر روش های سرمی در شیر قابل جستجو می باشد اما تاکنون از روش های مولکولی برای جستجوی آلودگی شیر به سالمونلا در این منطقه استفاده نشده است . هدف از تحقیق حاضر جستجوی آلودگی شیر با سالمونلا به روش تکثیر ژن invA و مقایسه آن با روش های معمول باکتریولوژی می باشد. مواد و روش کار: تعداد 100 نمونه شیر به صورت تصادفی از دامداری های صنعتی شهرستان ارومیه جمع آوری شد. پس از انجام کشت و آزمایشات بیوشیمیایی ، نمونه ها برای انجام آزمون PCR مورد استفاده قرار گرفتند. استخراج DNA باکتری به روش فنل کلروفرم به طور مستقیم از شیر انجام گرفت و با استفاده از پرایمرهای S139 و S141 اختصاصی برای ژن کدکننده عامل تهاجم به نام invA که در 99 % از سروتیپ های سالمونلا حضور دارد. آزمون PCR انجام گردید. محصول آن با استفاده از ژل آگارز 1 % الکتروفورز مشاهده شد و نتایج حاصل از کشت باکتریایی شیر با نتایج حاصل از آزمون PCR مورد مقایسه قرار گرفت . نتایج و بحث : در روش PCR بر روی شیر مشخص شد که 15 نمونه از 100 نمونه ( 15 % ) از نظر حضور سالمونلا مثبت بودند. در صورتی که در روش کشت هیچ مورد مثبتی یافت نشد. نتایج حاصل از مطالعه حاضر نشان داد که روش PCR به عنوان روشی حساس، دقیق و سریع در مقایسه با روش های سنتی رایج می تواند در تشخیص آلودگی شیر به سالمونلا به کار گرفته شود.

کلیدواژه ها:

سالمونلا ، شیر ، PCR ، invA