روزبه فلاحی - دانشیار موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران

ویروس ها از عوامل ایجادکننده خسارات هنگفت در پرورش آبزیان می باشند. انواع کشت های سلولی از جمله کشت های اولیه، روش های مناسبی برای تشخیص و جداسازی ویروس ها می باشند. از آنجاکه دسترسی به تیره های سلولی به ویژه در خصوص ماهیان براحتی سایر گونه ها نمی باشد و نیز برای تمام ماهیان هنوز تیره سلولی ایجاد نگردیده است، لذا در این تحقیق اقدام به تهیه و استاندارد نمودن کشت سلولی اولیه ماهی گردید. نمونه هایی از اندام های داخلی ماهی قرمز (Carassius auratus) شامل کلیه، کبد، عضلات و تخمدان و نیز از اندام های خارجی شامل باله ها، بافت همبند قسمت پوزه و آبشش ها، تهیه و بر طبق دستورالعمل های استاندارد آماده گردیدند. جهت تهیه کشت سلولی اولیه ماهی از روش های هضم آنزیمی کوتاه مدت، طولانی مدت، روش نشا کاری بافت های ریز شده و روش معمولی استفاده گردید. از محیط کشت EMEM غنی شده با سرم جنین گاو در درجه حرارت 25 درجه سانتی گراد استفاده گردید. سلول های بدست آمده از روش های مختلف، رشد مناسبی داشته و به سطح پوششی کامل رسیدند و از آن ها چندین پاساژ متوالی تهیه گردید. بهترین نتیجه، از اندام های تخمدان و عضلات و روش هضم آنزیمی طولانی مدت با آنزیم تریپسین بدست آمد. با بکارگیری نتایج این تحقیق می توان در مواقع لزوم نسبت به تهیه کشت سلولی اولیه جهت جدا سازی ویروس ها و تشخیص بیماری های ویروسی ماهیان در کشور اقدام نمود.

کشت, سلول, اولیه, ماهی