بررسی بیان موقت آنتی ژن HA1 ویروس آنفلوانزای پرندگان (H5N1) در گیاهان یونجه، سویا و کاهو به روش آگرواینفیلتراسیون

  • سال انتشار: 1395
  • محل انتشار: فصلنامه بیوتکنولوژی کشاورزی، دوره: 8، شماره: 1
  • کد COI اختصاصی: JR_JOAGK-8-1_005
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 525
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

افسانه سادات فرساد

دانشجوی دکترای بیوتکنولوژی کشاورزی-گروه بیوتکنولوژی و اصلاح نباتات-دانشکده کشاورزی-دانشگاه فردوسی مشهد

سعید ملک زاده شفارودی

دانشیار گروه بیوتکولوژی و اصلاح نباتات- دانشکده کشاورزی- دانشگاه فردوسی مشهد

نسرین مشتاقی

دانشیار گروه بیوتکولوژی و اصلاح نباتات- دانشکده کشاورزی- دانشگاه فردوسی مشهد

فاطمه فتوحی

استادیار مرکز تحقیقات آنفلوانزای انستیتو پاستور ایران

چکیده

 آنتی ژن HA1 ایمونوژن اصلی تولید کننده بیماری فوق حاد پرندگان (H5N1) می­باشد که منجر به بروز اپیدمی و پاندمی­های متعددی در جهان شده است. با توجه به اهمیت فناوری جدید تولید پروتئین­های نوترکیب در گیاهان، تولید این پروتئین نیز بسیار مورد توجه قرار دارد. در مطالعه حاضر از بیان موقت آنتی ژن HA1 به روش آگرواینفیلتراسیون، برای تولید این پروتئین نوترکیب درگیاهان یونجه، سویا و کاهو استفاده شده است. همچنین اثر سه پپتید راهنمای KDEL، Extensin و پپتید راهنمای ZERA در تجمع پروتئین به ترتیب در شبکه آندوپلاسمی، فضای آپوپلاستی و اجسام پروتئینی مورد بررسی قرار گرفت. 72 ساعت بعد از آگرواینفیلتراسیون، نتایج qRT-PCR نشان داد که کاهو بیشترین و سویا کمترین میزان رونوشت از ژن HA1 را داشت. بیان موقت پروتئین در برگ­های تراریخت، با استفاده از تکنیک الایزا اندازه­­گیری شد. نتایج آزمون الیزا نشان داد که با هدف گذاری پروتئین به فضای آپوپلاستی، گیاه یونجه بیشترین تجمع پروتئین را داشته­است. در حالی که کاهو علیرغم رونویسی بالا از ژن HA1 تجمع پروتئین نوترکیب کمتری را نشان داد. بنابراین با استفاده از روش آگرواینفیلتراسیون و انتقال سازه بیانی HA1، نتایج نشان داد که گیاه یونجه و هدایت پروتئین به آپوپلاست راهکار مناسبی جهت تولید پروتئین های نوترکیب HA1 است.

کلیدواژه ها

آگرواینفیلتراسیون, آنتی ژن HA1, سویا, کاهو, یونجه

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.