نسرین زکی زاده چایگانی - دانشجوی کارشناسی ارشد ژنتیک، دانشگاه آزاد اسلامی واحد اشکذر
سیدمحمد مشتاقیون - استادیار گروه زیست شناسی، پردیس علوم، دانشگاه یزد

ژن های tRNA میتوکندری اجزای ضروری بیوسنتز پروتیین هستند. این ژنها نقاط مهم برای جهش هستند. این جهش ها با طیف گسترده ای از بیماریهای انسانی در ارتباط اند. بسیاری از عوامل ژنتیکی در ارزیابی سقط مکرر (RPL) شناخته شده است. هدف از این تحقیق شناسایی جهش های tRNA لوسین میتوکندریایی در زنان مبتلا به سقط مکرر با علل ناشناخته می باشد. در این مطالعه استخراج DNA از نمونه خون 100 زن مبتلا به سقط مکرر با علل ناشناخته و 100 زن سالم انجام گرفت. پس از طراحی پرایمر برای قطعات ژنی مورد مطالعه، تکثیر قطعات ژنی توسط PCR صورت گرفت و محصولات PCR با استفاده از تکنیک SSCP، بر روی ژل پلی اکریل آمید 10٪ الکتروفورز شدند. قطعاتی که شیفت باندی از خود نشان دادند به عنوان نمونه های مشکوک به جهش، جهت تعیین توالی ارسال شده و نتایج تعیین توالی با بهره گیری از سایتها و نرم افزارهای متناسب با اهداف این تحقیق، مورد آنالیز قرار گرفتند. به طور کلی جایگزینی نوکلیوتیدی در tRNA لوسین در دو بیمار مورد مطالعه پیدا شد که این جایگزینی قبلا در بیماری CPEO شناخته شده بود. سه جایگزینی نوکلیوتیدی در tRNA هیستیدین مشاهده شد که یک مورد مربوط به جایگزینی 12192A > G بود که قبلا در بیماری CM شناخته شده بود و در مورد مربوط به جایگزینی 12172A > G بود که جایگزینی جدیدی می باشد و ممکن است با سقط مکرر در ارتباط باشد. این جهش های tRNAs می توانند سطح حالت پایدار مولکول را تغییر دهند و ساختار tRNA ها را تحت تاثیر قرار دهند. این باعث نقص سنتز پروتیین و به نوبه خود اختلال در عملکرد میتوکندری می شود. جهشهای این ژنها ممکن است در ارزیابی RPL کمک کنند. مطالعه روی جمعیت بزرگتر و طیف گسترده تری از این جهش های tRNA برای توصیف نقش و علت آنها در RPL ایدیوپاتیک توصیه می شود.

PCR - SSCP ، سقط مکرر ایدیوپاتیک، tRNA لوسین،tRNA هیستیدین، جهشهای میتوکندریایی