بابک براتی - دانشگاه جامع امام حسین(ع) – دانشکده و پژوهشکده علوم پایه – فرکز علم و فناوری زیست شناسی
فیروز ابراهیمی
شهرتم نظریان

وبا می تواند از طریق آب توسط باکتری ویبریو کلرا ایجاد شود و مورد توجه بیوتروریست ها نیز میب اشد. ایجاد توانایی برای پیش گیری از عوامل بیولوژیک در برابر بیوتروریست ها روشی مناسب برای افزایش قدرت پدافندی در برابر آنهاست. هر چند این ایمن-سازی برای دوره زمانی کوتاهی دوام دارد اما حفاظت فوری را فراهم می کند. پلاسمید pET28a نوترکیب واجد ژن ctb در سلول-های مستعد اشریشیاکلی ترانسفورم و بیان پروتیین با IPTG القاء شد. rCTB تولید شده پس از تخلیص جهت ایمن سازی مرغ-های تخمگذار مورد استفاده گرفت. تیتر آنتی بادی اختصاصی در خون مرغ ها با الایزا ارزیابی و با استفاده از نمک طعام اقدام به تخلیص IgY اختصاصی علیه بخش B سم وبا از زرده تخم مرغ گردید سپس اثر IgY تخلیص شده در پیشگیری از مرگ نوزادان موش به چالش کشیده شده با دوز کشنده ویبریوکلرا بررسی گردید. پروتیینی با وزن تقریبی 15 کیلودالتون با بیان بسیار بالا در ژل SD-PAGE در نمونه های القاء شده، مشاهده گردید. چنین پروتیینی در نمونه های القاء نشده وجود نداشت. خلوص پروتیین نوترکیب تخلیص شده با ستون نیکل روی ژل SDS-PAGE و وجود rCTB با وسترنبلات تایید گردید. افزایش تیتر آنتی بادی خون مرغ های ایمن شده با rCTB توسط الایزا مشاهده گردید. تخلیص IgY از زرده تخممرغ روی ژل آکریل آمید تایید گردید. نوزادان موش به چالش کشیده شده با ویبریوکلرا توسط ایمنی غیرفعال و تلقیح خوراکی IgY محافظت شدند. آنتی بادی های تولید شده علیه بخش B کلراتوکسین می تواند سم را خنثی کند و به عنوان ایمنی غیرفعال و یک عامل پیشگیری در برابر بیماری وبا بکار گرفته شود.

ایمنی غیرفعال، پیشگیری، ویبریو کلرا ، IgY، وبا