بررسی سینتیکی و فلوریمتری آنزیم اسیدفسفاتاز در حضور نانوذره ی Fe3O4

اسیدفسفاتاز EC(3.1.3.2 ( یا اورتوفسفریک مونواستر، خانواده ای از آنزیم هاست که هیدرولیز مونواسترازها و انهیدریدهای فسفریک اسید را برای تولید فسفات معدنی در رنج 7- pH =4 و pH اپتیم 3/ 5- 5 در دمای 37 درجه ی سانتیگراد، کاتالیز می کند. آنزیم اسید فسفاتاز استفاده شده در این پژوهش، از منشا سیب زمینی شیرین گونه ی ایپوماییا باتاتاس است که هومودایمری با وزن مولکولی تقریبی 110 کیلو دالتون که هر مونومر آن دارای 473 زیر واحد آمینو اسیدی می باشد. در این مطالعه، تاثیر نانوذره ی Fe3O4 بر روی آنزیم اسیدفسفاتاز بررسی شد و اثرات آ نها بر فعالیت سینتیکی و نیز شدت نشر فلورسانس آنزیم اسیدفسفاتاز مورد آزمایش قرار گرفت .دربررسی های سینتیکی، از دستگاه اسپکتروفوتومتر UV-Vis فارماسیا مدل Ultrospect 1100Pro -استفاده شد. همچنین در آزمایشهای فلوریمتری، از دستگاه اسپکتروفلوریمتر شرکت شیمادزو مدل RF-5301PC استفاده گردید. مطالعات سینتیکی نشان می دهد که در حضور غلظتهای مختلف نانو ذره ی Km Fe3O کاهش و Vmax افزایش یافته است؛ بنابراین این نانو ذره در این غلظتها، فعالیت آنزیم را افزایش داده است. مطالعات بر روی شدت نشر فلورسانس آنزیم بیان می کند که این نانو ذره در غلظتهای موردنظر، شدت نشر فلورسانس آنزیم را کاهش داده است بنابراین به عنوان خاموش کننده برای آنزیم عمل کرده است. بر اساس نمودار استرن- ولمر و با توجه به مقادیر ثابت خاموشی ) Kq ( ، خاموشی صورت گرفته از نوع استاتیک بوده است. پارامترهای ترمودینامیکی برای ،Fe3O4 نشان می دهد که بره مکنش غالب در اتصال نانوذره ی Fe3O4 و آنزیم، برهمکنش هیدروفوب بوده است.

کلیدواژه ها:

آنزیم اسیدفسفاتاز ، فعالیت سینتیکی ، شدت نشر فلورسانس ، خاموش کنندهFe3O4