همسانه سازی و انتقال آنزیم T7RNA پلیمراز باکتریوفاژ T7 به توتون
- سال انتشار: 1395
- محل انتشار: دوفصلنامه مهندسی ژنتیک و ایمنی زیستی، دوره: 5، شماره: 2
- کد COI اختصاصی: JR_GEB-5-2_001
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 809
نویسندگان
دانشجوی دکتری بیوتکنولوژی کشاورزی
استادیار گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه بوعلی سینا همدان
استادیار دانشکده کشاورزی دانشگاه پیام نور همدان
استادیار گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه بوعلی سینا همدان
چکیده
کشاورزی مولکولی به تولید پروتیین های دارویی و آنزیم های صنعتی توسط گیاهان از طریق مهندسی ژنتیک اطلاق می شود. آنزیم T7RNA پلیمراز یکی از مهمترین آنزیم هاست که به طور وسیعی در زمینه های مختلف بیوتکنولوژی و زیست شناسی سلولی و مولکولی، از قبیل سنتز و مطالعه ساختار و عملکرد RNA ها در شرایط آزمایشگاهی استفاده می شود. RNAهای سنتز شده در شرایط آزمایشگاهی در هیبریداسیون، ریزآرایه، آزمایشات RNAi و RNA آنتی سنس کاربرد دارد. این آنزیم همچنین در سیستم های بیانی وابسته به پیشبر و خاتمه دهنده T7 کاربرد فراوان دارد. آنزیم T7RNA پلیمراز یک آنزیم باکتریوفاژی بوده و فعالیت اصلی آن در سیتوپلاسم می باشد. تحقیق حاضر جهت همسانه سازی، انتقال ژن آنزیم T7RNA پلیمراز به هسته سلولهای یوکاریوتی و تولید آن در گیاه توتون انجام گرفت. آغازگرهای مناسب از روی توالی ژن T7RNA پلیمراز به همراه توالی های مناسب برای آنزیم های برشی، طراحی و ژن T7RNA پلیمراز مورد نظر پس از جداسازی در ناقل بیانی pCAMBIA1304 همسانه سازی شد. به منظور اطمینان از همسانه سازی، سازه تهیه شده با استفاده از PCR، هضم آنزیمی و توالی یابی بررسی شده و همردیفی آن در بانک اطلاعاتی اسیدهای نوکلییک تایید گردید. سپس، سازه نوترکیب به کمک سویه LB4404 آگروباکتریوم به گیاهان توتون منتقل و گیاهان تراریخته بر روی محیط های کشت انتخابی حاوی آنتی بیوتیک های هیگرومایسین و سفوتاکسیم، باززا شدند. حضور و بیان ژن T7RNA پلیمراز در گیاهان تراریخته با روش های PCR و RT- PCR تایید شد.کلیدواژه ها
آنزیم T7RNA پلیمراز، همسانه سازی، انتقال ژن، توتون، کشاورزی مولکولیمقالات مرتبط جدید
اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.