لاتین Pet24 تحت پروموتور T7 کلون و بیان مولکولی فاکتور محرک گرانولوسیت- ماکروفاژ در حامل بیانی

  • سال انتشار: 1395
  • محل انتشار: نوزدهمین کنگره ملی و هفتمین کنگره بین المللی زیست شناسی ایران
  • کد COI اختصاصی: BIOCONF19_530
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 611
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

لیلا وردست زاده سردرود

دانشکده فناوری های نوین پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گلستان، گرگان، ایران

عزت الله ضرغامی

دانشکده علوم نوین پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز، تبریز، ایران

مجید شهبازی

مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی گلستان، گرگان، ایران

چکیده

فاکتور محرک گرانولوسیت - ماکروفاژ یکی از چهار گلیکوپروتیین ویژه ای است که در تولید سلول های رده گرانولوسیت و مونوسیت نقش دارد و به خاطر تاثیر آن در رشد جمعیت های مختلف سلول های خونی، جهت بهبود بی نظمی های خونسازی در بیماری های خونی در کلینیک کاربرد دارد. در تحقیق حاضر به منظور بهینه سازی ژن GMCSF انسانی و سنتز آن، کلونینگ در وکتور Puc18-SamI و میزبان E .coli و DH5α انجام شد. به منطور دستیابی به قطعه ژن مورد نظر، هضم آنزیمی با استفاده از آنزیم های Ndel و BamH1 صورت گرفت. ژن در حامل بیانی pET24 تحت پروموتور T7 جاسازی شد و در E .coli Bl21 و DE3 ساب کلون گردید. سلول ها به صورت over night در محیط LB واجد کانامایسین رشد داده شدند و پس از القا با IPTG پروتیین به صورت انکلوژن بادی بیان شد. محلول سازی پروتیین نوترکیب با استفاده از ماده احیاکننده DDT انجام شد. بیان پروتیین نوترکیب با استفاده از وسترن بلات تایید گردید. نتایج وسترن بلات وجود باندی مطابق با استاندارد kD 14/5 را نشان داد که تایید کننده بیان پروتیین و وجود ژن در میزبان بود. این تحقیق به منظور دستیابی به کابردهای دارویی GMCSF در درمان سندرم های میلودیسپلازی، میلوساپرسیو ناشی از شیمی درمانی یا پیوند مغز استخوان و به عنوان ادجوانت واکسنی، انجام شد

کلیدواژه ها

کلون کردن، فاکتور محرک کلنی گرانولوسیت- ماکروفاژ، Pet24

مقالات مرتبط جدید

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.