بررسی تاثیر بیان همزمان چاپرون های DnaK و DnaJ با کربونیک انیدراز بر میزان حلالیت آن در باکتری E. Coli
- سال انتشار: 1396
- محل انتشار: چهارمین کنفرانس بین المللی پژوهشهای کاربردی در علوم شیمی و زیست شناسی
- کد COI اختصاصی: CBGCONF04_213
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 751
نویسندگان
دانشجوی کارشناسی ارشد بیوشیمی، گروه علوم پایه، دانشگاه گیلان، رشت، ایران
استادیار گروه علوم پایه، دانشگاه گیلان، رشت، ایران
مربی پژوهش، عضو هیات علمی مرکز ملی ذخایر ژنتیکی و زیستی ایران
چکیده
در این تحقیق عملکرد چاپرونی DnaK و DnaJ بر روی میزان حلالیت آنزیم کربونیک انیدراز (CA) در یک میزبان بیانی مناسب، با بیان همزمان ژنهای مذکور با ژن هدف بررسی شد. به دلیل استفاده از داروهای مهارکننده آنزیم کربونیک انیدراز در درمان گلوکوم و همچنین تومورهای سرطانی، تولید انبوه این آنزیم در بیوتکنولوژی مدرن مورد توجه است، گرچه تولید انبوه آن در سلول میزبان با مشکلاتی همچون تشکیل اجسام تجمعی1 و غیرفعال مواجه خواهد شد. جهت رفع مشکل میتوان از پروتیینهای کمکی با نام چاپرونهای مولکولی استفاده کرد. در این مطالعه ژن کربونیک انیدراز و ژنهای چاپرونی DnaJ و DnaK از سویه Bacillus cereus با پی سی آر تکثیر شده و پس از T/A کلون، به ترتیب در وکتورهای بیانی pET19b وpET28a کلون شدند و در نهایت به میزبان بیانی E. coli سویه BL21 منتقل شدند . با انجام SDS-PAGE میزان بیان پروتیین ها مورد ارزیابی قرار گرفت، نتیجه حاکی از آن بود که ژن چاپرونی DnaK که نقش اصلی را در سیستم چاپرونی خانواده Hsp70 به عهده دارد، بر روی حلالیت کربونیک انیدراز موثر بوده ولی ژن DnaJ که نقش کمکی را در عملکرد صحیح DnaK در این سیستم چاپرونی بازی می کند، نتوانست به تنهایی بر حلالیت بیشتر این آنزیم تاثیرگذار باشد.کلیدواژه ها
کربونیک انیدراز، بیان هم زمان، چاپرون های مولکولیDnaJ و DnaKمقالات مرتبط جدید
اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.