خالص سازی وتعیین خصوصیات سینتیکی آنزیم آسپاراژیناز در باکتری سراشیا مارسسنس
- سال انتشار: 1395
- محل انتشار: همایش ملی فناوری های نوین در مهندسی شیمی
- کد COI اختصاصی: NTICE01_148
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 754
نویسندگان
گروه مهندسی شیمی، واحد شهرضا،دانشگاه آزاد اسلامی
گروه مهندسی شیمی، واحد شهرضا،دانشگاه آزاد اسلامی
چکیده
آسپاراژیناز یک آنزیم هیدرولاز می باشد که آسپاراژین را به آمونیوم و آسپارتیت تبدیل می کند. این آنزیم کاربرد موثری در درمان لوسمی لنفوبلاستیک دارد. سراشیا (Serratia (باکتری گرم منفی و متحرکی هست که به خوبی در محیطهای آزمایشگاهی پرورش مییابد.سراشیاها دارای کپسول کوچکی میباشند و کلونیهای آن دارای رنگیزه سفید - صورتی و یا قرمز میباشند معمولا در شرایط اتاق قادر به تولید رنگیزه) رنگیزه (میباشند. رنگیزه قرمز در سطح محیط مولر هینتون بهتر مشاهده میشود. ماده رنگی آن به نام پرودیزوزن یاپیریمین نامیده میشود.ماده رنگی پرودیزوزن که در کلونیهای سراشیا مارسسنس دیده میشود این باکتری را میتوان از عفونتهای ریوی-ادراری و خون جدا کرد.کشت آنها بوی ماهی یا ادرار میدهد.سراشیا مارسسنس (marcescens Serratia (از گونههای معروف آن است و از اهمیت بالایی برخوردار است. این باکتری قادر به تخمیر مالتوز - مانیتول و سوکروز میباشد.سیترات مثبت و اندول - اوره آز - متیل رد وSH 2 منفی است. از خصوصیت پیگمانزایی سراشیا مارسنس به عنوان مارکر ذرات غبار در محیط و در بیمارستان استفاده میشودو تولید پیگمان بهوسیله گرماگذاری در دمای اتاق تشدید میشود. marcescens Serratia یک باکتری گرم منفی است که کلنیهای آن دارای رنگیزه قرمز می باشند که می توانددر صورت حضور آسپاراژین در محیط کشت خود، تولید آنزیم آسپاراژیناز نماید. در این تحقیق آنزیم آسپاراژیناز از محیط کشت Serratia خالص سازی و همچنین فاکتور های کینتیکی آن تعیین شد. باکتری Serratia در محیط مایع حاوی پپتون،عصاره مالت و آسپاراژین کشت شد و محیط بعد از 44 ساعت سانتریفیوژ شد و محلول رویی که دارای آنزیم آسپاراژیناز بود برای مطالعات کینتیکی و خالص سازی مورد استفاده قرار گرفت. مراحل تخلیص آنزیم با استفاده از رسوب دهی با آمونیوم سولفات و به دنبال آن دیالیز و ستون کروماتوگرافی DEAE سلولز انجام شد. انجام الکتروفورز به روش PAGE-SDS باندی با وزن مولکولی تقریبی حدود54 kDa را بر روی ژل نشان داد که نشان دهنده خلوص آنزیم بود. مقایسه تاثیر تغییرات 4-10 (pH (بر فعالیت آنزیم نشان داد که بیشترین فعالیت آنزیم در 7 pH است، و بررسی تغییرات دما بر فعالیت آنزیم نشان داد که بیشترین فعالیت در دمای 40 درجه سانتی گراد می باشد. همچنین مقدار فاکتور های کینتیکی Vmax و Km در این آنزیم مشخص گردید.کلیدواژه ها
آنزیم، آسپاراژیناز، marcescens Serratia ، فاکتور های کینتیکی، خالص سازیمقالات مرتبط جدید
- سنتز نانو ماده اکسیدگرافن و بررسی تاثیر آن بر روی مقاومت شیمیایی رنگ آلکیدی
- پیش بینی نرخ های تولید چندفازی (نفت، گاز و آب) با استفاده از روش های یادگیری ماشین: مرور بر روش ها و کاربردها
- روشهای کنترل داده محور در مهندسی شیمی
- بررسی جداسازی گاز پروپیلن از پروپان در غشای ۶FDA-durene با استفاده از روش شبیه سازی مولکولی
اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.