ردیابی مولکولی باکتری عامل بیماری میوه سبز مرکبات مبتنی بر تکنیک های استخراج دی ان ای با غشاء نیتروسلولزی و PCR
- سال انتشار: 1395
- محل انتشار: اولین همایش بین المللی و دومین همایش ملی کشاورزی،محیط زیست و امنیت غذایی
- کد COI اختصاصی: AEFSJ02_340
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 425
نویسندگان
بخش تحقیقات گیاه پزشکی، مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی و منابع طبیعی جنوب استان کرمان، سازمان تحقیقات و آموزش کشاورزی،جیرفت، ایران و دانشگاه آزاد اسلامی واحد جیرفت، جیرفت، ایران
بخش تحقیقات گیاه پزشکی، مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی و منابع طبیعی جنوب استان کرمان، سازمان تحقیقات و آموزش کشاورزی،جیرفت، ایران و دانشگاه آزاد اسلامی واحد جیرفت، جیرفت، ایران
چکیده
واکنش زنجیره ای پلیمراز، حساسترین، مطمین ترین و عمومی ترین روش جهت ردیابی مولکولی عامل بیماریگرینینگ (میوه سبز) مرکبات بشمار می رود. استفاده از این تکنیک مستلزم تهیه دی ان ای از بافت گیاهی و انجامPCR با روش های غالبا پیچیده و زمانبر می باشد. در این تحقیق ما یک روش استخراج دی ان ای مبتنی بر کاغذنیتروسلولزی در تلفیق با واکنش زنجیره ای پلیمراز با استفاده از آغازگرهای اختصاصی را برای ردیابی باکتری عاملگرینینگ بهینه سازی نمودیم. برای این منظور ابتدا رگبرگ های حاصل از درختان مرکبات سالم و مبتلا به بیماریگرینینگ بدون استفاده از ازت مایع در محلول NaOH-EDTA پودر و روی کاغذ نیتروسلولزی لکه گذاری شد. سپسلکه ها از روی کاغذ پانچ شده و دی ان ای متصل به آنها با قرار دادن کاغذ نیتروسلولز در دمای 90 درجه سانتیگراد بهمدت 10 دقیقه، در آب مقطر استریل رها سازی و برای انجام واکنش زنجیره ای پلیمراز با استفاده از جفت آغازگراختصاصی fp400/rp400 مورد استفاده قرار گرفت. کارایی ردیابی باکتری عامل بیماری میوه سبز به این روش با سایرروش ها و دستورالعمل های آزمایشگاهی در آزمون های واکنش زنجیره ای پلیمراز مستقیم و آشیانه ای مورد مقایسه قرارگرفت. روش معرفی شده در این تحقیق سریع و ارزان بوده و بویژه برای ردیابی باکتری عامل بیماری میوه سبز در باغاتو نهالستان های مرکبات که همزمان تعداد زیادی نمونه بایستی مورد بررسی قرار گیرد بسیار مناسب است. کاغذ هایلکه گذاری شده می توانند برای مدتی نگهداری شده و یا براحتی به آزمایشگاه های مرجع برای ردیابی مولکولی عاملبیماری ارسال شوند.کلیدواژه ها
بیماری میوه سبز، نیتروسلولز، PCRمقالات مرتبط جدید
- مروری بر کپسولاسیون کاروتنوئیدها به روش خشک کن پاششی
- مطالعه ویژگیهای زراعی و عملکرد دانه تریتیکاله در شهرستان شیروان
- اهمیت گیاهان دارویی در باروری حیوانات مزرعه
- بررسی تاثیر حضور آنتی بیوتیک سفالکسین بر روی ویژگیهای بیولوژیکی لجن فعال
- بررسی اثر تغییرات اقلیمی و گرمایش جهانی بر پیدایش و گسترش بیابانهای غذایی و اثرات متعاقب آن بر محیط زیست
اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.