جداسازی و بررسی ژن AREB به منظور بررسی مقاومت به خشکی گیاه فلفل قرمز

فلفل قرمز گیاهیست که به منظور استفاده از میوه قرمز رنگ آن، با اهداف زیادی از جمله مصرف در صنایع غذایی، رنگ و پزشکیکشت می شود. به علت با ارزش بودن میوه این گیاه، شناخت ژن های شرکت کننده در مسیر مقاومت به تنش ها از مهمترین مسایل اینگیاه است، که با روشن شدن این مسیر می توان ابتکار عمل در نظم میوه دهی و تا حدودی زمان رسیدن محصول و عوامل محیطی موثربر آن را در دست گرفت. برای کشف و شناخت بهتر از مکانیزم مولکولی موثر در آغاز رشد گیاه، به طور اختصاصی ژن و میزان بیان ژنAREB مورد بررسی قرار گرفت. توالی این ژن همسانی بالایی با اعضای خانواده جعبه G دارد (از عوامل رونویسی در بیان پروتیین هایکنترل تنش ها) دارند. در این پژوهش، ژن AREB با استفاده از منابع بیوانفورماتیک، مورد مطالعه قرار گرفت و پرایمرها جهت تکثیر اینژن طراحی شدند. در ادامه، cDNA آن توسط آنزیم رونوشت بردار معکوس ساخته شد و به عنوان الگو برای تکثیر ژن AREB درواکنش PCR مورد استفاده قرار گرفت. میزان بیان ژن AREB در ساقه و ریشه بیشترین و در برگها کمترین مقدار را نشان دادند. طیواکنش PCR قطعه ایی به طول 950 جفت باز از cDNA و قطعه ای به طول 1350 جفت باز از DNA ژنومی تکثیر یافت. این ژن،یک پروتیین 225 اسیدآمینه ای را رمز می کند که دارای منطقه با توالی جعبه G می باشد. با تجزیه و تحلیل ساختار مولکولی پروتیینرونوشت شده و بر اساس مدل سازی همولوژیکی، شکل فضایی آن نشان داد، که این پروتیین ساختاری منظم دارد.