همسان سازی ژن آنزیم مونومریک سارکوزیت اکسیداز باکتری Bacillus coagulans در باکتری E.coli

  • سال انتشار: 1395
  • محل انتشار: سومین کنفرانس ملی و اولین کنفرانس بین المللی پژوهش های کاربردی در علوم شیمی و مهندسی شیمی و سومین کنفرانس ملی و اولین کنفرانس بین المللی پژوهش های کاربردی در زیست شناسی
  • کد COI اختصاصی: CBGCONF03_152
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 1196
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

زهرا محمدی آوین

دانشجوی کارشناسی ارشد دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم دارویی

زهرا امینی بیات

هیئت علمی پژوهشکده بیوتکنولوژی سازمان پژوهشهای علمی و صنعتی ایران

سپیده عباس زاده

دانشجوی کارشناسی ارشد سازمان پژوهشهای علمی و صنعتی ایران

چکیده

مونومریک سارکوزین اکسیداز EC1.5.3.1 یک پروتئین منومر است که به خانواده فلاووآنزیمها تعلق دارد این انزیم دارای 381 اسیدآمینه بوده و یک آنزیم کاتالیز کننده وابسته به اکسیژن که سارکوزین را به گلاسین، فرمالدئید و پراکسید هیدروژن تبدیل می کند و یک جزء کلیدی در بیوسنسور کراتینین است ودر ارزیابی عملکردکلیه و آسی عضله مورد استفاده قرار می گیرد در این تحقیق هدف همسانه سازی ژن مونومریک سارکوزین اکسیداز از Bacillus coagulans در E.coli Top10 می باشد. ابتدا ژن این آنزیم از باکتری Bacillus coagulans توسط PCR تکثیر شد سپس محصول PCR و وکتور بیانی pET28a توسط آنزیمهای برشی Xho1 و Nco1 برش داده شده و محصولات حاصل از هضم آنزیمی توسط آنزیم T4DNA ligase به هم متصل شده و محصول ligation وکتور نوترکیب درو باکتری E.coli مستعد شده ترانسفورم گردید و روی محیط لوریا برتانی LB آگار حاوی کانامایسین کشت داده شد . به منظور تایید صحت همسانه سازی colony PCR تعیین توالی و هضم آنزیمی و کتور نوترکیب استخراج شده با انزیمهای محدودگر Xho1 و Nco1 انجام گردید. نتایج تایید کننده همسانه سازی ژن آنزیم منومریک سارکوزین اکسیداز در وکتور pET28a در غالب صحیح می باشد.

کلیدواژه ها

همسانه سازی ، انزیم مونومریک سارکوزین اکسیداز bacillus coagulans، فلاووآنزیم

مقالات مرتبط جدید

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.