علی بهرامی - مرکز تحقیقات علوم و فنون آوری زیستی، گروه مهندسی بیوشیمی، تهران
محمدعلی نصیری - مرکز تحقیقات علوم و فنون آوری زیستی، گروه مهندسی بیوشیمی، تهران
نادر مقصودی - مرکز تحقیقات علوم و فنون آوری زیستی، گروه مهندسی بیوشیمی، تهران

بهترین ترکیب محیط کشت برای باکتری E.coli BLR (DE3) plysS[PE22b+2APRO] شامل 15g/l عصاره مخمر، 10g/I پیتون و 5g/l کلرید سدیم بدست آمد. سپس سینتیک رشد باکتری و اثر القا برای تولید انزیم -2A پروتئیناز در فرمانتور همزندار بررسی شد. مشخص شد که القاء کشت با ترکیب IPTG با غلظت 1 میلی مولار در دانسیته سلولی OD900nm=0.7 بهترین شرایط القا می باشد. در ادامه پس از لیز سلولی و تهیه انکلوژن بادی نسبتا خالص ریفولدینگ و خالص سازی -2A پروتئیناز در یک مرحله با استفاده از کروماتوگرافی تغویض یونی –Q سفارز و با خلوص بیش از 95% بدست آمد.

اشرشیاکلی ، کروماتوگرافی ، تخمیر ، -2A پروتئیناز