Method Optimization of Reverse Phase High Performance Liquid Chromatography (RP-HPLC) for Characterization of Digested Products of Recombinant Pro-Insulin

  • سال انتشار: 1384
  • محل انتشار: چهارمین همایش ملی بیوتکنولوژی ایران
  • کد COI اختصاصی: NBCI04_344
  • زبان مقاله: انگلیسی
  • تعداد مشاهده: 2023
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

Maryam Omidi

Biotechnology Research Center, Pasteur institute tehran

Soroush Sardari

Maryam Zakeri

Behrouz Vaziri

چکیده

Recombinant insulin has been produced by expressing multiple joined pro-insulin genes in E.coli. Refolded pro-insulin has been converted to insulin upon brief reactions with trypsin and carboxypeptidase-B. Finally, the bioactive insulin is separated by RP-HPLC (Mukhopadhyay, 1997, Marks, 1989). In this study, the effect of several parameters on RP-HPLC of recombinant pro-insulin was investigated. These parameters were TFA concentration (0.05-0.2 %), temperature (room temperature up to 500C), gradient (0-100% acetonitrile in different times) and flow rate (0.6-1 ml/min). We suggested the optimum gradient for separation and characterization of digested products of pro-insulin especially insulin and arg-insulin using 0-100% acetonitrile with 0.1% TFA in 80 minute at flow rate of 0.8 ml/min in 45C.

کلیدواژه ها

HPLC, Chromatography, Insulin, Arg-insulin

مقالات مرتبط جدید

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.