استفاده از ویروس (Epstein-Barr Virus) EBV جهت تهیه و شناسایی سلول های با توان بیان mRNA مربوط به ژن تلومراز (hTERT)
- سال انتشار: 1384
- محل انتشار: چهارمین همایش ملی بیوتکنولوژی ایران
- کد COI اختصاصی: NBCI04_250
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 2087
نویسندگان
موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی ، بخش بیوتکنولوژی، کرج
چکیده
سوبستراهای سلولی در مطالعات مربوط به ویروس ها اهمیت بالایی دارند. مطالعات نشان داده ویروس EBV با ترانسفورم کردن سلول های لنفوسیت انسان با روشن شدن تلومراز ارتباط دارد. با توجه به این مسئله که این ژن در سلولهای طبیعی خاموش می باشد لنفوسیتهای انسانی پس از جداسازی، با ویروس EBV,Epstein - Barr Virus ترانسفورم گردید. سپس این سلول ها به همراه تعداد دیگری از سلول های لاین لنفوسیت موجود در بانک سلولی انستیتو پاستور مطالعه و بررسی شد. برای بررسی فعالیت آنزیم تلومراز از پرایمر لنگر دار ACX, anchored primer و پرایمر معمولی TC استفاده گردید. پس از استخراج عصاره سلولی به کمک بافر لیز کننده حاوی VHAPS و EGTA فعالیت تلومراز به وسیله روش RT-PCR اختصاصی تلومراز به نام TRAP-PCR بررسی شد. ارزیابی اولیه به وسیله سیستم رنگ آمیزی اتیدیوم بروماید بر روی ژل PAGE و ارزیابی تیمه کمی به کمک روش آنزیمی (PCR-ELISA) صورت پذیرفت. از 28 سلول مورد مطالعه در حدود 90% سلول ها ژن تلومراز روشن و فعال بود. در 3 سلول فعالیت بسیار بالای تلومرازی مشاهده شد و در 4 سلول هم فعالیت تلومرازی محسوسی مشاهده نشد. در مجموع به نظر می رسد در بیشتر سلول های لنفوسیت ترانسفورم نمودن سلول های لنفوسیت موجب روشن شدن ژل تلومراز می گردد که می تواند دلیل جاودانه شدن (immoratility) این سلول ها باشد در باقی سلول ها ظاهراً مکانیسم ها و پروتئین های چرخه سلولی این پدیده را سبب می شوند.کلیدواژه ها
Telomerase activity, EBV, TRAP-PCRمقالات مرتبط جدید
اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.