CIVILICA We Respect the Science
(ناشر تخصصی کنفرانسهای کشور / شماره مجوز انتشارات از وزارت فرهنگ و ارشاد اسلامی: ۸۹۷۱)

تهیه کتابخانه فاژمیدی VHH بز علیه فاکتور رشد اندوتلیال رگی (VEGF ) و انتخاب VHH های اختصاصی علیه آن

عنوان مقاله: تهیه کتابخانه فاژمیدی VHH بز علیه فاکتور رشد اندوتلیال رگی (VEGF ) و انتخاب VHH های اختصاصی علیه آن
شناسه ملی مقاله: NBCI08_0968
منتشر شده در هشتمین همایش بیوتکنولوژی جمهوری اسلامی ایران و چهارمین همایش ملی امنیت زیستی در سال 1392
مشخصات نویسندگان مقاله:

زهرا جاویدان - گروه زیست شناسی دانشکده علوم ، دانشگاه شاهد تهران ایران
سید لطیف موسوی گرگری - گروه زیست شناسی دانشکده علوم ، دانشگاه شاهد تهران ایران
معصومه رجبی بذل - گروه بیوشیمی بالینی ، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی ، تهران ، ایران
شهرام نظریان - گروه زیست شناسی ، دانشکده علوم، دانشگاه امام حسین (ع) ، تهران ،ایران

خلاصه مقاله:
فاکتور رشد اندوتلیال رگی (VEGF) دارای نقشهای پر اهمیتی درآنژیوژنز (تشکیل رگهای خونی جدید ) در تومور سرطانی بوده و بنابراین مولکول هدف مناسبی برای درمان متاستاز سرطان می باشد . VHH (نانو بادی) ، دارای مزیتهای فراوانی برای درمان بیماریها می باشد . در این پروژه ابتدا یک کتابخانه فاژی بر علیه ناحیه اتصال به آنتی ژن VEGF-a ساخته شده و آنگاه نانو بادیهای دارای بیشترین تمایل اتصال به آنتی ژن از کتابخانه جدا شدند . روش: ناخیه اتصال به آنتی ژن VEGF-a به عنوان ایمنونوژن به شتر تزریق شد . پس از ایمن شدن شترها و تهیه لنفوسیت ،واکنش RT-PCR و nested PCR برای به دست آوردن VHH اجرا شد. قطعات VHH حاصل برای ساخت کتابخانه فاژی استفاده گردیدند . پس از رهاسازی فاژها و انجام مراحل غنی سازی، بهترین مرحله غنی سازی با استفاده از الایزا پلی کلونال فاژی انتخاب شده و تک کلونهای مناسب با یک تست الایزای مجدد جدا شدند . نتیجه تحقیق : پس از نهیه لنفوسیت و به دست آوردن RNA و cDNA، کتابخانه فاژی با موفقیت ساخته شده و چهار مرحله غنی سازی انجام شد . در تست فاژ الایزا مرحله سوم غنی سازی دااری بالاترین OD بوده و تک کلونها از این مرحله انتخاب گردیند .

کلمات کلیدی:
فاکتور ردش اندوتلیال رگی، نانو بادی، کتابخانه فاژی ، غنی سازی

صفحه اختصاصی مقاله و دریافت فایل کامل: https://civilica.com/doc/377560/