تهیه کتابخانه فاژمیدی VHH بز علیه فاکتور رشد اندوتلیال رگی (VEGF ) و انتخاب VHH های اختصاصی علیه آن

  • سال انتشار: 1392
  • محل انتشار: هشتمین همایش بیوتکنولوژی جمهوری اسلامی ایران و چهارمین همایش ملی امنیت زیستی
  • کد COI اختصاصی: NBCI08_0968
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 461
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

زهرا جاویدان

گروه زیست شناسی دانشکده علوم ، دانشگاه شاهد تهران ایران

سید لطیف موسوی گرگری

گروه زیست شناسی دانشکده علوم ، دانشگاه شاهد تهران ایران

معصومه رجبی بذل

گروه بیوشیمی بالینی ، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی ، تهران ، ایران

شهرام نظریان

گروه زیست شناسی ، دانشکده علوم، دانشگاه امام حسین (ع) ، تهران ،ایران

چکیده

فاکتور رشد اندوتلیال رگی (VEGF) دارای نقشهای پر اهمیتی درآنژیوژنز (تشکیل رگهای خونی جدید ) در تومور سرطانی بوده و بنابراین مولکول هدف مناسبی برای درمان متاستاز سرطان می باشد . VHH (نانو بادی) ، دارای مزیتهای فراوانی برای درمان بیماریها می باشد . در این پروژه ابتدا یک کتابخانه فاژی بر علیه ناحیه اتصال به آنتی ژن VEGF-a ساخته شده و آنگاه نانو بادیهای دارای بیشترین تمایل اتصال به آنتی ژن از کتابخانه جدا شدند . روش: ناخیه اتصال به آنتی ژن VEGF-a به عنوان ایمنونوژن به شتر تزریق شد . پس از ایمن شدن شترها و تهیه لنفوسیت ،واکنش RT-PCR و nested PCR برای به دست آوردن VHH اجرا شد. قطعات VHH حاصل برای ساخت کتابخانه فاژی استفاده گردیدند . پس از رهاسازی فاژها و انجام مراحل غنی سازی، بهترین مرحله غنی سازی با استفاده از الایزا پلی کلونال فاژی انتخاب شده و تک کلونهای مناسب با یک تست الایزای مجدد جدا شدند . نتیجه تحقیق : پس از نهیه لنفوسیت و به دست آوردن RNA و cDNA، کتابخانه فاژی با موفقیت ساخته شده و چهار مرحله غنی سازی انجام شد . در تست فاژ الایزا مرحله سوم غنی سازی دااری بالاترین OD بوده و تک کلونها از این مرحله انتخاب گردیند .

کلیدواژه ها

فاکتور ردش اندوتلیال رگی، نانو بادی، کتابخانه فاژی ، غنی سازی

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.