نگین اصلاحی - دانشجوی کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی کشاورزی، پژوهشکده زیست فناوری دانشگاه شیراز
علی نیازی - دانشجوی کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی کشاورزی، پژوهشکده زیست فناوری دانشگاه شیراز
فرزانه آرام - کارشناس آزمایشگاه پژوهشکده زیست فناوری دانشگاه شیراز

به کارگیری تکنولوژی DNA نوترکیب باعث تولید بسیاری از پروتئینها و پپتیدهای درمانی از منابع متنوع که توانایی بالقوه درمانی دارند گردیده است . یکی از روش های تولید پپتیدهای نوترکیب ، انتقال ژنهای آنها به سلولهای گیاهی و ایجاد ریشه مویین از این سلولها با استفاده از روش های انتقال ژن و کشت بافت گیاهی می باشد . در این تحقیق ژن لاکتوفریسین به منظور تولید پپتید نوترکیب به ریشه های مویین گیاه توتون منتقل گردید و پس از تولید ریشه مویین و استخراج پروتئین میزان خاصیت ضد باکتریایی آن مورد بررسی قرار گرفت . بدین منظور ابتدا ژن مذکور به طریقه مصنوعی سنتز و در وکتور بیان pBI121 همسانه سازی گردید و با استفاده از PCR و هضم آنزیمی مورد تایید قرار گرفت .جهت انتقال ژن به گیاه از باکتری Agrobacterium rhizogenes و ریزنمونه های برگی توتون استفاده شد . تایید ریشه های تراریخت با استفاده از آغاز گرهای اختصاصی ژن و PCR استفاده شد . برای ارزیابی خاصیت ضد باکتریایی پروتئین نوترکیب پروتئین نوترکیبتولید شده عمل استخراج پروتئین از ریشه های تراژن انجام گرفت و سپس با استفاده از روش انتشار دیکسی خاصیت ضد میکروبی آن مورد بررسی قرار گرفت . آنالیز بدست آمده مقاومت قابل ملاحظه ای نسبت به پروتئین شاهد را نشان داد .

DNA نوترکیب، لاتوفریسین نوترکیب، اگروباکتریوم رایزوژنز، پپتیدهای ضد میکروبی