تاثیر تغذیه پپتونی بر بهینه سازی بیان تولید پروتئین های نوترکیب در سیستم بیانی موقت (Transient Gene Expression) TGE در Shaking Incubator Feeding strategy effect on optimization of TGE (Transient Gene Expression) for Recombinant Protein Production in mammalian cellculture

امروزه نیاز به پروتئین های نوترکیب در تحقیقات پایه و کاربردهای بالینی رشد روزافزونی از خود نشان می دهد. بیان موقت پروتئین (Transient Gene Expression)TGE روش رایجی برای بیان پروتئین های نوترکیب در بازه زمانی کوتاه و در مقیاس مناسب جهت انجام تست های پیش بالینی (Preclinical) می باشد. در این مطالعه با دیدگاه Scale-up در بیوپروسه، اثر استراتژی های تغذیه ای با عوامل پپتونی مختلف برمیزان بیان و رشد پروتئین و تغییر رفتار متابولیک آن بررسی گردید. بدین منظور، بهینه سازی بیان فعال کننده پلاسمینوژن بافتی (t-PA) در سلول CHO با استفاده از 6 پپتون گیاهی (Soy,Casein) مختلف بررسی گردید.نتایج حاصل از این مطالعه بیانگر اثر مثبت تغذیه پپتونی برکارایی ترانسکشن transfection efficiency با میزان 5.44% ، 12.35% و 28.55% افزایش به ترتیب برای پپتون های caseineTryptone N1 ، Soy Peptone A2Sc و Soy peptone E110 بود. همچنین آنالیز نتایج بررسی میزان بیان پروتدین حاکی از افزایش میزان بیان به میزان 9.78% و 23.65% به ترتیب برای پپتون های 5 و 6 بود در حالیکه پپتون 4 تغییر قابل مشاهده ای نشان نداد. براساس این مطالعه تغذیه پپتونی روشی مناسب در بهینه سازی بیان پروتئین های نوترکیب در سلول های میزبان CHO به روش TGE می باشد.

کلیدواژه ها:

سلول CHO ، -PA ، TGE ، فیبرینوژن ، Peptone