بررسی نقش سیگنال پپتید PhoA بر بیان پری پلاسمیک دسیرودین (هیرودین) در E.coli
- سال انتشار: 1392
- محل انتشار: هشتمین همایش بیوتکنولوژی جمهوری اسلامی ایران و چهارمین همایش ملی امنیت زیستی
- کد COI اختصاصی: NBCI08_0587
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 854
نویسندگان
کارشناس ارشد سلولی و مولکولی، بخش بیوتکنولوژی پزشکی، انستیتوپاستور ایران
کارشناس ارشد سلولی و مولکولی، بخش بیوتکنولوژی پزشکی، انستیتو پاستور ایران
کارشناس ارشدبیوتکنولوژی، بخش بیوتکنولوژی پزشکی، انستیتوپاستور ایران
استادیار، بخش بیوتکنولوژی پزشکی، انستیتو پاستور ایران
چکیده
هدف:با توجه به مزیت های دارویی هیرودین و ارجحیت آن به هپارین به عنوان داروی ضد انعقاد، تولید آن در کشور ضروریست. هیرودین پروتئینی با 65 تا 66 اسید آمینه که از غدد بزاقی زالو ترشح می گردد و بازدارنده ی قوی ترومبین است. بیان بالای هیرودین برای میزبان ایکلی توکسیک بوده، لذا از سیستم های ترشحی استفاده شد. مواد و روش ها: ترادف 66 نوکلئوتیدی واریانت HV3 ژن هیرودین تهیه وبه یک وکتور بیانی قوی (خانواده pET) انتقال داده شد. برای تسهیل در تخلیص پروتئین از His-tag در انتهای N ژن استفاده شد. سیگنال پپتید PhoA در ابتدای ژن با هدف ترشح به فضای پری پلاسمیک و محیط کشت درج شد و بیان توسط سویه ای BL21(DE3)،اOrigamiB(DE3) اندازه گیری شد. در نهایت محصول تولیدی در سیتوپلاسم، فضای پری پلاسمی و محیط کشت اندازه گیری شد. نتایج و بحث: با روش SDS-PAGE، بیان پروتئین دیده شد و با وسترن بلاتینگ تایید شد. بیان پروتئین در هر دو سویه تقریبا به یک اندازه بود. نتایج نشان داد مقدار پروتئین بیشتری در فضای پری پلاسمی بیان شده و مقدار کمی پروتئین به محیط کشت نیز ترشح شد.کلیدواژه ها
سیگنال پپتید PhoA،| اشرشیا کولی، هیرودین، دسیرودیناطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.