طراحی و ساخت کلون بیان کننده داروی ضد انعقادی دسیرودین (هیرودین) به شکل خارج سلولی در اشرشیا کلی
- سال انتشار: 1392
- محل انتشار: هشتمین همایش بیوتکنولوژی جمهوری اسلامی ایران و چهارمین همایش ملی امنیت زیستی
- کد COI اختصاصی: NBCI08_0585
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 1219
نویسندگان
کارشناس ارشد سلولی و مولکولی، بخش بیوتکنولوژی پزشکی، انستیتوپاستور ایران
کارشناس ارشد سلولی و مولکولی، بخش بیوتکنولوژی پزشکی، انستیتو پاستور ایران
کارشناس ارشد بیوتکنولوژی، بخش بیوتکنولوژی پزشکی، انیستیتو پاستور ایران
استادیار، بخش بیوتکنولوژی پزشکی، انستیتو پاستور ایران
چکیده
اهداف: در این تحقیق، استفاده از Signal sequence مورد توجه قرار گرفته است با توجه به اینکه هیرودین به طور طبیعی فاقد Signal sequence است، در نظر گرفته شده است که با الحاق این بخش به ژن هیرودین و بیان پروتئین هیرودین، مکان ترشح پروتئین به فضای پری پلاسمیک با محیط خارج سلول و با سیتوپلاسم مشخص گردد و پروتئین محلول به دست آید. مواد و روش ها: ترادف 66 نوکلئوتیدی واریانت HV3 ژن هیرودین تهیه و داخل یک وکتور بیانی قوی (خانواده pET) انتقال داده شد. برای تسهیل درتخلیص پروتئین از His-tag در انتهای N ژن استفاده شد. سیگنال پپتید pelB در ابتدای ژن با هدف ترشح به فضای پری پلاسمیک و محیط کشت درج شد و بیان توسط سویه OrigamiB(DE3) اندازه گیری شد. در نهایت محصول تولیدی در سیتوپلاسم، فضای پری پلاسمی و محیط کشت اندازه گیری شد. نتایج: با روش SDS-PAGE بیان پروتئین دیده شد و با وسترن بلاتینگ بیان پروتئین هیرودین تایید شد. نتایج نشان داد مقدار پروتئین بیشتری در فضای پری پلاسمی بیان شده و مقدار کمی پروتئین به محیط کشت نیز ترشح شد.کلیدواژه ها
سیگنال پپتید pelB،| اشرشیا کولی، هیرودین، دسیرودیناطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.