همسانه سازی و بیان فاکتور رشد فیبروبلاستی- نوترکیب انسانی در باکتری اشریشیا کلی

  • سال انتشار: 1390
  • محل انتشار: هفتمین همایش بیوتکنولوژی جمهوری اسلامی ایران
  • کد COI اختصاصی: NBCI07_1106
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 719
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

شهلا امیری اجیرلو

گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه شاهد، دانشجوی کارشناسی ارشد

ولی الله بابایی پور

گروه مهندسی بیوشیمی، پژوهشکده فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، هیئت علمی، دکتری تخصصی

میر لطیف موسوی

گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه شاهد، هیئت علمی، دکتری تخصصی

جلال الدین غنویی

ازمایشگاه تحقیقاتی مهندی بافت، بخش تحقیقات کاربری، بیمارستان آموزشی تحقیقاتی مسیح دانشوری، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، دکتری تخصصی، ه

چکیده

فاکتور رشد فیبروبلاستی- 10 انسانی (hFGF-10 ) گلیکو پروتئین مونومری است که توسط سلول های فیبروبلاستی در دوره ی جنینی تولید و موجب رشد و تمایز بافت ریه و تشکیل جوانه های دست و پا و رشد جهت دار آن به سمت خارج می شود و در بزرگسالی در ترمیم سلول های آسیب دیده ی ریه و زخم ها نقش ایفاء می کند. فاکتور رشد مزبور، تولید شده، بیشتر و صرفا در آزمایشگاه ها برای تولید بافت ریه استفاده می شود و نوع دارویی آن با نام تجاری رپی فرمین درحال گذراندن مراحل آزمایش های بالینی بر روی حیوانات و انسان می باشد. هدف این تحقیق همسانه سازی و بیان فاکتور رشد فیبروبلاستی- 10نوترکیب انسانی در باکتری اشریشیا کلی بود. بنابراین ژن سنتتیک فاکتور رشد فیبروبلاستی - 10 انسانی همسانه سازی شده در پلاسمید pET-28a(+) با استفاده از واکنش زنجیره ای پلیمراز استخراج و فراوان سازی شده و سپس در پلاسمیدهای بیانی pET-32a(+) و pET-22b(+) همسانه سازی و به باکتری اشریشیا کلی جهت تولید پروتئین نوترکیب مورد نظر منتقل شد. با این راهکار دو نوع همسان هی نوترکیب شامل pET22b+hFGF10 و pET32a+hFGF10 ساخته شد، که تحت شرایط رشد در دمای 30 و 37 درجه سانتی گراد، القاء بیان در غلظت های نهایی 0/2، 0/5 و 1 میلی مولار القاگر (IPTG) پروتئین نوترکیب موردنظر تولید و مورد تایید قرار گرفت.

کلیدواژه ها

فاکتور رشد فیبروبلاستی- 10 انسانی، ژن سنتتیک، تولید سیتوپلاسمی، بافت ریه، رپی فرمین

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.