استفاده از روش Nested-PCR برای تشخیص آلودگی کشت های سلولی به ویروس Pestivirus

سال انتشار: 1387
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 648

فایل این مقاله در 7 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

JR_JVR-63-1_003

تاریخ نمایه سازی: 11 اردیبهشت 1394

چکیده مقاله:

در این مطالعه یک روش Nested-PCR برای تشخیص دو ویروس BVDV از سویه NADL بهینه سازی گردید. در آزمایش RT-PCR قسمتی از منطقه غیرقابل ترجمه ناحیه 5 ویروس به طول 249 جفت باز تکثیر شد. محصول PCR دروکتور pTZ57R/T کلون گردید و نتیجه تعیین ردیف اسیدهای نوکلوتیدی آن اختصاصی بودن آزمایش را تأیید نمود. سپس پرایمرهای داخلی انخاب و ازمایش Nested-PCR انجام گردید و یک قطعه DNA به طول 155 جفت باز تکثیر شد. میزان حساسیت آزمایش 10TCID(5), RT-PCR و میزان حساسیت آزمایش Nested-PCR در تشخیص ویروس BVDV در کشت سلول، (10TCID(50 تعیین گردید. تعداد 7 نمونه از کشت های سلولی با سه روش PCR, ELISA و Nested-PCR مورد ازمایش قرار گرفتند. نتایج نشان داد که حساسیت روش های مولکولی در تشخیص ویروس در نمونه ها نسبت به روش ELISA بیشتر می باشد.

کلیدواژه ها:

نویسندگان

سیدعلی قرشی

گروه میکروبیولوژی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران- ایران

مرتضی دلیری جوپاری

گروه میکروبیولوژی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران- ایران

دینا مرشدی

گروه میکروبیولوژی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران- ایران

ترانه حاجیان

گروه میکروبیولوژی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران- ایران