بررسی تاثیر جایگاهN-گلیکوزیلاسیون بر ترشح فاکتور 9 انسانی نوترکیب
- سال انتشار: 1393
- محل انتشار: اولین کنگره بین المللی و سیزدهمین کنگره ژنتیک ایران
- کد COI اختصاصی: CIGS13_0584
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 1613
نویسندگان
دانشگاه علوم پزشکی تهران
پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
دانشگاه علوم پزشکی تهران
پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
چکیده
گلیکوزیلاسیونN- فرایند اتصال زنجیره قندی به آسپاراژین موجود در توالیN-X-S/Tمی باشد که بر روی برخی از پروتئین های ترشحی و غشایی اتفاق می افتد. مطالعات اخیر نشان داده است که با معرفی یک جایگاه جدیدN-گلیکوزیلاسیون به انتهای آمینی یاکربوکسیلی برخی از پروتئین ها، می توان ترشح آنها را در سلولهای یوکاریوتی افزایش داد. در تحقیق حاضر به منظور بررسی تاثیرn-گلیکوزیلاسیون بر ترشح فاکتور 9 انسانی نوترکیب در سلولهایCHOبا استفاده از روش جهش زایی هدفمند 1، دو واریانت هایپرگلیکوزیله شده فاکتور 9 انسانی ساخته شد که هر کدام دارای یک جایگاه جدید N -گلیکوزیلاسیون بودند. طراحی جایگاههای جدیدN-گلیکوزیلاسیون در انتهای آمینی و در دومین گلای فاکتور 9، بر پایه مطالعات بیوانفورماتیکی انجام شد. سپس با روش جهش زایی هدفمند، کدون مربوط به توالیN-گلیکوزیلاسیون در جایگاه های مشخص شده درcDNAفاکتور 9 انسانی وارد شد. ژنهای جهش یافته و طبیعی در وکتور بیانیpCEP4 و در پایین دست پروموترCMVهمسانه سازی شد. پس از وارد کردن سازه های نوترکیب به سلولهای CHO میزان بیان و ترشح فاکتور 9 انسانی نوترکیب طبیعی و جهش یافته ها با روش الایزا در یک بازه زمانی 72 ساعتی مورد بررسی قرارگرفت. نتایج نشان داد که میزان بیان فاکتور 9 هایپرگلیکوزیله در مقایسه با فرم طبیعی آن تا دو برابر افزایش داشته است.کلیدواژه ها
فاکتور 9 انعقادی انسانی نوترکیب ، N-گلیکوزیلاسیون ، سلولهایCHO ، ترشح پروتئیناطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.