طراحی و ساخت ناقل اختصاصیRNAiبرای زیرواحد آلفا گلیادین گندم

بیماری سلیاک که به آن آنتروپاتی گلوتن نیز گفته میشود، به عنوان عدم تحمل گلوتن شناخته شده است. گلوتن به دو خانواده پروتئینی گلوتنینها وگلیادینها تقسیم میشود. گلیادینها خود به سه نوع ساختاریω و γ ،α تقسیم میشود. از روشهای موثر پیشرو در رفع مشکلات ناشی از پروتئینهای حساسیتزا، فناوریRNAi است که برای خاموشی یا کاهش بیان ژن به کارگرفته میشود. درتحقیق حاضر ابتدا از طریق بانکهای اطلاعاتیDNA توالی ژنa - گلیادین درگیر در سنتز پروتئین های حساسیتزا مورد بررسی قرارگرفت و برای تکثیر اختصاصی آن، آغازگرهای موردنیاز با استفاده از نرم افزار پرایمر بلاست طراحی گردید و برای سنتز سفارش داده شد. بعد از تکثیر قطعات ژنی و خالص سازی از ژل آگارز، قطعات به وکتورpTG19 متصل و بعد از همسانه سازی توسط باکتریE.coliتوالی یابی گردیدو پس از اطمینان از صحت توالی همسانه سازی شده، اقدام به ساخت سازهRNAiگردید. سازه مذکور شامل دو قطعه ژنیa -گلیادین بادو طول متفاوت میباشد که به طور معکوس در داخل وکتور قرار گرفته و ساختارRNAiمورد نظر را ایجاد میکنند.

کلیدواژه ها:

فنآوریRNAi ، گلوتن ، گندم ، وکتور ، همسانه سازی