کلونینگ و بیان آنتیژن پروتئینی Esat-6 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در باکتری اشرشیا کلی

  • سال انتشار: 1393
  • محل انتشار: اولین کنگره بین المللی و سیزدهمین کنگره ژنتیک ایران
  • کد COI اختصاصی: CIGS13_0039
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 560
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

شهرزاد آهنگرزاده

دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، دانشکده پزشکی،گروه بیوتکنولوژی

مژگان بنده پور

دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، دانشکده پزشکی،گروه بیوتکنولوژی

هرام کاظمی

دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، دانشکده پزشکی،گروه بیوتکنولوژی

فاطمه یاریان

دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، دانشکده پزشکی،گروه بیوتکنولوژی

چکیده

سل یکی از مشکلات عمده بهداشتی است. پروتئینEsat-6یکی از مهمترین پروتئینهای ایمنی زا در مایکوباکتریوم توبرکلوزیس است که بوسیله سلولهای Tشناخته میشود و باعث القای پاسخهای ایمنی سلولی قوی میشود. هدف از این مطالعه کلونینگ و بیان پروتئینEsat-6مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در اشرشیا کلی بود. مواد و روش هاDNAکد کنندهEsat-6پس از بررسی از بانک ژن اخذ شد و در وکتورpGHسنتز گردید. توسط پرایمرهای یونیورسال پلاسمید تکثیر و پس از برش با آنزیمهای محدودگر در ناقل بیانی پروکاریوتیpQE30کلون شد و به باکتریE. coliسویهBl21انتقال داده شد و تولید پروتئین با القا توسطIPTGو بهینه سازی شرایط صورت گرفت. یافته ها: پلاسمید نوترکیب به وسیلهPCRکلونی، هضم آنزیمی و توالییابیDNAمورد تائید قرار گرفت. پروتئینهای بیان شده به روشSDS-PAGEآنالیز و تولید پروتئینEsat-6با استفاده از آنتیبادی اختصاصی ضدHis tagبه روشWestern blotتأیید گردید. نتیجه گیری: پروتئین مورد نظر در باکتری کلون و بیان شد. با توجه به اینکه آنتی ژنEsat-اختصاصی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس بوده و در مراحل اولیه بیماری سل ترشح میشود میتوان از آن برای طراحی آنتی بادی ضدEsat-6و جهت تشخیص سل نهفته و فعال استفاده نمود

کلیدواژه ها

کلونینگ، بیان، مایکوباکتریوم توبرکلوزیس،Esat-6

مقالات مرتبط جدید

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.