CIVILICA We Respect the Science
(ناشر تخصصی کنفرانسهای کشور / شماره مجوز انتشارات از وزارت فرهنگ و ارشاد اسلامی: ۸۹۷۱)

تولید پروتئین نوترکیبTaxویروس HTLV1در سویه باکتریایی RosettaDE3

عنوان مقاله: تولید پروتئین نوترکیبTaxویروس HTLV1در سویه باکتریایی RosettaDE3
شناسه ملی مقاله: JR_IJMM-5-1_006
منتشر شده در شماره 1 دوره 5 فصل بهار و تابستان در سال 1390
مشخصات نویسندگان مقاله:

سمانه صفار - دانشجوی کارشناسی ارشد بیوشیمی بالینی، گروه بیوشیمی بالینی ، دانشکده پزشکی ، دانشگاه علوم پزشکی تهران
مجید گل کار - استادیار، بخش انگل شناسی، انستیتو پاستور ایران، تهران
مهدی امینیان - استادیار، گروه بیوشیمی بالینی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران
حسام میرشهابی - دانشجوی دکتری ویروس شناسی، گروه ویروس شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس،

خلاصه مقاله:
اولین رتروویروس انسانیHTLV شناخته شده است که در انسان تولید بیماری می کند . عمده فیزیوپاتولوژی بیماری های مربوط بهHTLV1 به خصوصیات پروتئینTaxاین ویروس مربوط می شود . استفاده از گونه های جهش یافته پروتئینTaxدر کنار داروهای تنظیم کننده سیستم ایمنی می تواند به عنوان تعدیل کننده پاسخ های ایمنی قوی در طراحی واکسن بکار گرفته شود. این پاسخ های ایمنی مضر، باعث بیماریHAM-TSPمی شود و تعدیل آنها راه امیدی را برای درمان بیماران در پیش رو قرار می دهد . به این علت تولید پروتئین نوترکیبTaxهدف این مطالعه قرار گرفت.روش بررسی: توالی کد کننده پروتئینTaxحاوی جه شR222Kموجود در وکتورpcDNA3.1+توسطبرش با آنزیم هایXhoI و BamHIخارج شده و در وکتور بیانیpET32a(+)با همین جایگاههای برش در سویه E.coliDH5α کلون گردید. وکتور نوترکیب پس از تایید صحت کلونینگ توسط فرایندهای هضم آنزیمیcolony PCR و تعیین توالی ژن کلون شده، به میزبان بیانیE.coli Rosetta(DE3منتقل و القاء بیان صورت گرفت سپس بیان پروتئین با آنالیزSDS-PAGEو وسترن بلات بررسی شد. در نهایت خصلت آنتی ژنیسیته پروتئین نوترکیب از طریق وسترن بلات با سرم افراد بیمار تایید گردیدنتیجه گیری: پروتئین به دست آمده می تواند به عنوان آنتی ژن نوترکیب ویوسی بیان شده و توسط آنتی بادی بیماران به درستی شناسایی گردد

کلمات کلیدی:
کلونینگ ، Tax ،HTLV1 ، وسترن بلات ، SDS-PAGE

صفحه اختصاصی مقاله و دریافت فایل کامل: https://civilica.com/doc/302438/