کاربرد PCR با استفاده از پرایمرهای کد کننده پروتئین های غشای خارجیOmpW جهت تعیین هویت ویبریو کلرا و مقایسه آن با روش های استاندارد کشت و تست های بیو شیمیایی

سال انتشار: 1386
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 656

فایل این مقاله در 6 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

JR_IJMM-1-2_003

تاریخ نمایه سازی: 5 آبان 1393

چکیده مقاله:

ویبریو کلرا عامل بیماری اسهالی وبا می باشد، که بعنوان عامل بیماری و مرگ ومیر در بسیاری از مناطق جهان محسوب می گردد. سویه های1O و 139 O ویبریو کلرا عامل ایجاد کننده وبای کلاسیک بوده و دیگر سویه های ویبریو کلرا از جمله ویبریوهای غیر آگلوتینه شوندهNAG می توانند عامل بیماری اسهالی در انسان بصورت تک گیر باشند. به دلیل مشابهت خصوصیات بیوشیمیایی ویبریو کلرا با سایر گونه های ویبریو و آئروموناس، بندرت تشخیص آزمایشگاهی توسط کشت و تست های بیوشیمیایی، تعیین هویت این ارگانیسم را مشکل ساز می نماید. در تحقیق حاضر انجام تکنیکPCRجهت تعیین هویت ویبریو کلرا مورد استفاده قرار گرفت و نیز سویه هایNAGجدا شده از نظر سروتیپO139مورد بررسی قرار گرفتند.تعداد ١۵۶ مورد ویبریو کلرای جدا شده از نمونه های محیطی و بالینی توسط کشت و تست های بیوشیمیایی وسروتایپینگ، از نظر مولکولی مورد بررسی قرار گرفتند. تستPCRبا استفاده از پرایمر های اختصاصی کد کننده پروتئین های غشاء خارجیOmpW برای تایید موارد ویبریو کلرا و پرایمرهای اختصاصیO139-rfbبرای جستجوی سروتایپO139 روی سویه های NAGانجام گرفت.در روش متداول آزمایشگاهی ، ۶ مورد به عنوان ویبریو کلرای التورO1سروتایپ اوگاوا ( ۵ عدد) و هیکوجیما (یک عدد)و ١۵٠ مورد بعنوان سوش های غیر آگلوتینه شونده ویبریو کلراNAGجدا سازی شدند. توسط تکنیکPCRاز ١۵۶ نمونه، ١٣۶ نمونه87/1% مثبت شد که نتایج کشت را تائید می نمود. هیچیک از سویه هایNAGتوسط پرایمرهای اختصاصیO139 مثبت نگردیدنددر تحقیق حاضر تکنیکPCRمزیت قابل توجهی نسبت به روش های تشخیصی غیر مولکولی نشان نداد. گونه غالب ویبریو کلرا در منطقه مورد بررسی NAGتشخیص داده شد. تعداد موارد معدود بیماریزای جدا شده سروتیپO1 اوگاوا بود وهیچ موردی ازO139در منطقه شناسایی نگردید.

کلیدواژه ها:

ویبریو کلرا ، PCR ، پروتئین های غشای خارجی ، NAG

نویسندگان

آذر دخت خسروی

گروه میکروب شناسی دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز و مرکز تحقیقات بیماری های عفونی و گرمسیری دانشگاه

عفت سیاسی

گروه میکروب شناسی دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز

عبدالرزاف هاشمی

گروه میکروب شناسی دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز

منیژه اسکندری

آزمایشگاه رفرانس التور مرکز بهداشت اهواز