خالص سازی و بررسی خواص سینتیکی آنزیم هیستامیناز از گونه خلر ( Lathyrus sativus ) با استفاده از کروماتوگرافی تعویض آنیون
- سال انتشار: 1391
- محل انتشار: مجله یافته، دوره: 14، شماره: 2
- کد COI اختصاصی: JR_YAFTE-14-2_005
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 47
نویسندگان
Faculty of Veterinary Medicine, Lorestan University, Khorramabad, Iran
Razi Herbal Medicines Research Center, Lorestan University of Medical Sciences, Khorramabad, Iran
Razi Herbal Medicines Research Center, Lorestan University of Medical Sciences, Khorramabad, Iran
Medicinal and Natural Products and Chemistry Research Center, Shiraz University of Medical Sciences, Shiraz, Iran
Medicinal and Natural Products and Chemistry Research Center, Shiraz University of Medical Sciences, Shiraz, Iran
چکیده
مقدمه: مسمومیت با هیستامین به طور مستقیم در ارتباط با نگهداری نامناسب غذاها می باشد. دی آمین اکسیداز، دآمیناسیون اکسیداتیو هیستامین و آمین های بیوژنیک دیگر مانند کاداورین و پوترسین را کاتالیز می کند. دی آمین اکسیدازهای گیاهی پراکندگی زیادی در خانواده لگومینه مانند نخود، خلر و ماش دارند. به این دلیل، این مطالعه انجام گرفت تا خالص سازی و خواص کینتیکی آنزیم هیستامیناز از جوانه های خلر آزمایش گردد. بحث و نتیجه گیری: در مجموع آنزیم هیستامیناز گیاهی به عنوان یک آنزیم جدید در پیشگیری از مسمومیت با هیستامین امیدوار کننده است یافته ها: فعالیت ویژه آنزیم نهایی خالص شده برای سوبسترای هیستامین ۵۰ واحد در میلی گرم پروتئین یادداشت شد و خواص کینتیکی آنزیم (۰۵/۳=Vmax ، ۵/۲=Km) و هموژنوسیتی آنزیم خالص شده بوسیله SDS-PAGE در ناحیه ۷۲ کیلو دالتون نشان داده شد. مواد و روش ها: خالص سازی آنزیم بوسیله روش انجام شده فدریکو و همکاران با یکسری تغییرات بود. به طور کوتاه، با استفاده از رسوب دادن بوسیله سولفات آمونیوم، دیالیز علیه بافر پتاسیم ۵۰ میلی مولار ۷pH= به مدت ۱۸ ساعت، تغلیظ بوسیله کیسه های دیالیز بر روی پلی اتیلن گلیکول، گذاشتن روی ستون DEAE-۵۲ سفادکس که قبلا با بافر فسفات پتاسیم ۱۵ میلی مولار و ۵/۵pH= به تعادل رسیده بود حاوی یک میکرومول CuCl۲ و در نهایت آنزیم با افزایش شیب نمک در M ۲/۰ خارج گردید. هموژنوسیته آنزیم بوسیله تکنیک SDS-PAGE در هر مرحله تائید شد و فعالیت دی آمین اکسیداز بوسیله اسپکتروفتومتر مشخص گردید.کلیدواژه ها
Histaminase, Enzyme kinetic, Lathyrus sativus, هیستامیناز، کینتیک آنزیمی، Lathyrus sativusاطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.