طراحی و ساخت سازه ژنی نوترکیب بیان کننده ژن حفاظت کننده سلولی
- سال انتشار: 1392
- محل انتشار: مجله یافته، دوره: 15، شماره: 5
- کد COI اختصاصی: JR_YAFTE-15-5_005
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 30
نویسندگان
چکیده
بحث و نتیجه گیری: ساخت سازه نوترکیبMT۱-pccDNA۳.۱ و ورود موفق آن به درون سلول های بنیادی مزانشیمی می تواند به عنوان یکی از راهبردهای محافظت سلول های پیوندی از مرگ سلولی پیشنهاد گردد و ممکن است بتواند راه کاری جدید در راستای ارتقاء کارآمدی سلول درمانی بعد از پیوند را فراهم آورد. مواد و روش ها: سلول های بنیادی مزانشیمی از مغز استخوان انسان جداسازی و توسط روش فلوسایتومتری تایید شدند. توالی کامل cDNA ژن MT۱ جداسازی شد و برای وارد شدن در وکتور پلاسمیدی pcDNA ۳.۱ مورد استفاده قرار گرفت. سازه ژنی نوترکیب ایجاد شده، به روش لیپوفکشن وارد MSCs گردید. بیان MT۱ توسط RT-PCR و لکه گذاری وسترن پایش شد. یافته ها: ژن MT۱ انسانی نوترکیب با موفقیت در وکتور pcDNA کلون گردید و درست قرار گرفتن ژن در قالب صحیح درون وکتور به وسیله تعیین توالی DNA تایید شد. افزایش بیان MT۱ در MSCs به وسیله روش های RT-PCR و لکه گذاری وسترن مورد تایید قرار گرفت. این نتایج نشان دهنده بیان موقت MT۱ در MSCs بود. مقدمه: دست ورزی ژنتیکی یک راهبرد موثر برای حفاظت سلول ها در برابر آسیب های محیطی و بالا بردن توانمندی آنان در استفاده های درمانی است. به منظور جلوگیری از عوارض ناخواسته ای همچون ایجاد بدخیمی ها، دست کاری ژنتیکی و افزایش بیان ژن های حاصل از آن می بایست به صورت موقت باشد. هدف از انجام این پژوهش، کلونینگ و افزایش بیان ژن محافظ سلولی "متالوتیونین یک" (MT۱) انسانی به صورت موقت در سلول های بنیادی مزانشیمی (MSCs) با استفاده از سیستم بیانی پلاسمیدی و استفاده از وکتور pcDNA ۳.۱ بود. این افزایش بیان به منظور افزایش مقاومت سلول های مزانشیمی نسبت به آسیب های محیطی و ... است.کلیدواژه ها
Mesenchymal stem cells, Metallothionein ۱, pcDNA ۳.۱., سلول های بنیادی مزانشیمیاطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.