مقایسه میزان تولید پروتئین نوترکیب در دو رده سلولی CHO و MCF۷
- سال انتشار: 1393
- محل انتشار: مجله یافته، دوره: 16، شماره: 2
- کد COI اختصاصی: JR_YAFTE-16-2_012
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 40
نویسندگان
Department of Virology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
Department of Virology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran, soleim_h@modares.ac.ir
Department of Virology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran, soleim_h@modares.ac.ir
Department of Virology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
چکیده
مقدمه: هدف ازمطالعه ی حاضر، مشخص نمودن رده سلولی مناسب تر، جهت مطالعات تولید پروتئین در سیستم های یوکاریوتی می باشد. پس از ترانسفکشن، تغییرات ایجاد شده در سطوح بیانیRNA و پروتئین نوترکیب هدف ارزیابی شد. مواد و روش ها: به منظور بررسی بیان ژن مورد نظر و تولید پروتئین نوترکیب E۶ پاپیلوما ویروس انسانی تیپ ۱۶ در سلول های مورد آزمایش، از پلاسمید نوترکیب pcDNA۳-E۶ و نیز دو رده سلولی متفاوت MCF۷ و CHO استفاده گردید. به این منظور به دنبال ترانفکشن، بیانRNA و پروتئین هدف بوسیله واکنش زنجیره ای پلیمراز معکوس (RT-PCR) و آزمایش لکه گذاری وسترن با استفاده از ژل SDS-PAGE و مونوکلونال آنتی بادی Anti-E۶ ارزیابی گردید. یافته ها: در این مطالعه به دلیل غلظت بسیار پایین پروتئین تولیدی در سلول های MCF۷ ، آزمایش RT-PCR مثبت و آزمایش وسترن بلاتینگ آن منفی شد، این در حالی است که در رده سلولی CHO هر دو آزمایش ذکر شده مثبت شدند بحث و نتیجه گیری: با توجه به نتایج بدست آمده توصیه می شود از سلول CHO به منظور ترانسفکشن و تولید پروتئین نوترکیب در سیستم هایی که تولید بالای پروتئین امکان پذیر نیست استفاده گرددکلیدواژه ها
Transfection, MCF۷, CHO, RT-PCR, Western blotting, ترانسفکشن, MCF۷, CHO, RT-PCR, وسترن بلاتینگ.اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.