ملینا یاربخت - دانشجوی ارشد بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تربیت مدرس
مختار جلالی جواران - دانشیار گروه اصلاح نباتات و بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تربیت مدرس
مریم نیکخواه - دانشیار گروه اصلاح نباتات و بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تربیت مدرس
مهدی محب الدینی - استادیار گروه اصلاح نباتات، دانشکده کشاورزی، دانشگاه اردبیل

تولید پروتئین نوترکیب در کلروپلاست در مقایسه با انتقال هسته ای ژن یک سری مزایا دارد. حامل کلروپلاستی pKCZ دربردارنده ژن پروانسولین انسانی به روش شوک حرارتی به باکتری E.coli سویه DH5α انتقال داده شد و باکتری های تراریخته بر روی محیط حاوی 0/1 میلی گرم بر میلی لیتر آنتی بیوتیک آمپی سیلین انتخاب شدند. حضور ژن پروانسولین در کلونی های باکتری تراریخته شده با استفاده از انالیز PCR تأئید شد. از آنجایی که کلروپلاست دارای منشا باکتریایی می باشد و ماشین ساخت پروتئین در کلروپلاست مشابه نوع باکتریایی می باشد، بیان ژن پروانسولین ابتدا در باکتری E.coli با استفاده از سازه pKCZ-Ins مورد بررسی قرار گرفت، باکتری حاوی سازه را در محیط حاوی 0/1 میلی گرم بر میلی لیتر آمپی سیلین و غلظت های مختلف آنتی بیوتیک اسپکتینومایسین کشت و تولید پروتئین پروانسولین را با آزمون بلات نقطه ای و SDS-PAGE مورد آزمون قرار گرفت.

کلروپلاست، پروتئین نوترکیب، پروانسولین