Evaluation of the α۲-Antipalsmin-Resistance of a Domain Exchanged-Chimeric Streptokinase from Two Streptococci Groups
- سال انتشار: 1397
- محل انتشار: مجله تحقیقات پاتوبیولوژی، دوره: 22، شماره: 2
- کد COI اختصاصی: JR_PRJMS-22-2_003
- زبان مقاله: انگلیسی
- تعداد مشاهده: 100
نویسندگان
Virology & Microbiology Department, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran
Nano Biotechnology Department, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran
Microbiology Department, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran
Virology Department, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran
Virology Department, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran
چکیده
Aims: The chimeric domain-exchanged streptokinase (SKch) between two sk genes from groups G and A streptococci (SK۲aG۸۸ and SK۲bALAB۴۹, respectively) was constructed to evaluate the role of SK-domains (α, β, γ) in α۲-antipalsmin-resistance variations of SK. Materials and Methods: In this experimental study, PCR-amplified genes of streptococci (skg, ska) were cloned into pET۲۶b vector to produce pET۲۶-SKG۸۸ and pET۲۶-SKALAB۴۹. For domain exchange, the amplicon containing β and g domains of SK۲bALAB۴۹ was replaced for that of the SK۲aG۸۸ within pET-SK۲aG۸۸ (pET۲۶-SKch; α۲aG۸۸β۲bALABγ۲bALAB). All constructs were confirmed by restriction analyses/agarose-gel electrophoresis and DNA sequencing, transformed into E.coli Rosetta, and induced by IPTG for protein expression. Proteins were purified by Ni-NTA chromatography, quantified by Bradford method, and analyzed by SDS-PAGE/Western blotting assays. The α۲-antipalsmin-resistance was measured by S۲۲۵۱ colorimetric assay for plasminogen activation. Findings: SDS-PAGE and western blotting results indicated the expression of proteins with the size of ۴۷kD. At the highest concentration of α۲-antiplasmin, SK۲aG۸۸ remained ۸۰% active, whereas the SK۲bALAB۴۹ and SKch retained ۵۵% of their activity. Conclusion: SKch shows similar activity reduction, indicating the minor role of the α domain compared to β and g domains for α۲-antipalsmin-resistance.کلیدواژه ها
Streptokinase, Domain exchange, Chimera, α۲-Antiplasmin, استرپتوکیناز, تبادل دومین, کایمر, آلفا دو آنتی پلاسمیناطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.