تکثیر و کلونینیگ و بیان ژن S۲ کروناویروس در باکتری Lactococcus lactisبه منظور طراحی واکسن های نوترکیب
- سال انتشار: 1403
- محل انتشار: فصلنامه طب دریا، دوره: 6، شماره: 4
- کد COI اختصاصی: JR_JMARMED-6-4_008
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 41
نویسندگان
Islamic Azad University,
Razi Vaccine and Serum Research Institute,
Islamic Azad University,
Iranian Fisheries Science Research Institute
Razi Vaccine and Serum Research Institute, Agricultural, Research Education and Extension Organization (AREEO), Arak, Iran
چکیده
زمینه و هدف: همه گیری گسترده و تداوم کووید-۱۹، ناشی از SARS-CoV-۲، یک تهدید جدی برای عموم مردم جهان است و همچنان تهدیدی برای سلامتی عموم و بار سنگینی بر کل جامعه بشری تحمیل می کند. در حال حاضر، چندین واکسن عضلانی با موفقیت ساخته شده است و واکسیناسیون انبوه در بسیاری از کشورها پیشرفت کرده است. اغلب شواهدی در مورداستفاده از پروبیوتیک های نوترکیب، به ویژه باکتری های اسیدلاکتیک (LAB) به عنوان حامل واکسن ارائه می گردد. باتوجه به نقش حیاتی گلیکوپروتئین SARS-CoV-۲ spike (S) در اتصال ویروس، ورود و القای آنتی بادی های خنثی کننده، پروتئین S به طور گسترده به عنوان هدفی برای ساخت واکسن مورداستفاده قرار گرفته است. در این پژوهش تلاش بر این بوده است که ژن S۲ زیر واحد اسپایک در باکتری Lactococcus lactis کلون و بیان شود. روش ها: در این مطالعه، ژن S۲ که در پژوهش قبلی تکثیر و در پلاسمید PWPI کلون شده بود مورد استفاده قرار گرفت، این با واکنش PCR تکثیر و پس از جداسازی ژن در پلاسمید واسط PJET-۱.۲blunt کلون و برای نگهداری بهتر به باکتری E.Coli DH۵α منتقل شد سپس ژن S۲ از پلاسمید PJET-۱.۲blunt بریده، در پلاسمید PNZ۸۱۴۹ کلون و برای تکثیر و بیان پلاسمید کلون شده به باکتری Lactococcus lactis سویه NZ۳۹۰۰۰ منتقل شد. یافته ها: با توجه به یافته های پژوهش، ژن S۲ با سایز ۱۴۳۲bp بخوبی تکثیر و جدا سازی و در پلا سمید pNz۸۱۴۹ کلون و پس از انتقال به باکتری L.lactis NZ۳۹۰۰۰ بیان شد پروتئین S۲ در اندازه۵۱ کیلودالتون بر روی ژل SDS-PAGE مشاهده شد. نتیجه گیری: با توجه به نتایج بدست آمده، انتقال ژن ویروس های بیماریزا به باکتریهای سودمند روده ای (LAB) می توانند به عنوان حامل وکاندید واکسن خوراکی باشند.کلیدواژه ها
COVID-۱۹, SARS-CoV-۲, Gene Expression, Recombinant Protein, Cloning, S۲ Gene, کووید-۱۹, SARS-COV-۲, بیان ژن, پروتئین نوترکیب, کلون سازی, ژن S۲اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.