پوریا غلامی تیلکو - دانشجوی کارشناسی ارشد از بخش زیست فناوری میکروبی دانشگاه تهران
زهرا حاجی حسن - هیات علمی دانشگاه تهران
نوید نظری - دانشجوی کارشناسی ارشد دانشکده علوم و فنون نوین دانشگاه تهران
حمید مقیمی - استادیار بخش زیست فناوری میکروبی دانشگاه تهران

تولید پروتئینهای نوترکیب در میزبان باکتریایی ای کلای در چند دهه اخیر بسیار رواج پیداکرده است. مطالعات و آزمایشهای بسیار زیادی در زمینه بهینه سازی و افزایش تولید و بیان پروتئینهای نوترکیب در این میزبان انجام گرفته است. از راههای افزایش تولید، رسیدن به تراکم بالای سلولی (افزایش غلظت سلولی) و به طبع آن تولید بیشتر پروتئینهای داخل سلولی ازجمله پروتئین نوترکیب –NGF βمیباشد. بدین منظور در این پژوهش برای اولین بار با استفاده از گلیسرول و عصاره مخمر به عنوان منابع کربن و نیتروژن و همچنین نمک MgCl۲ به عنوان افزایش دهنده رشد، کشت باکتری در تراکم سلولی بالا انجام شد. همچنین تاثیر شرایط کشت شبانه بر رشد باکتری مورد بررسی قرار گرفت. بهینه شرایط با استفاده از روش سطح پاسخ به دست آمد که شامل غلظت ۱۸/۲۳ گرم بر لیتر گلیسرول، غلظت ۱۴/۴۴ گرم بر لیتر عصاره مخمر و غلظت mM ۱۰ نمک MgCl۲ میباشد. همچنین کشت ۱۴ ساعته در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد و دور شیکرrpm ۱۸۰ به عنوان شرایط بهینه رشد معرفی شد. این مطالعه نشان داد که میزان رشد سلولی و تولید پروتئین نوترکیب –NGF β در شرایط بهینه شده نسبت به محیط کشت پایه افزایش قابل توجهی داشته است.

glycerol؛ yeast extract؛ MgCl۲؛ response surface methodology (RSM)؛ overnight culture, گلیسرول, عصاره مخمر, روش سطح پاسخ, کشت شبانه, MgCl۲