غربالگری ملکولی سراشیامارسیسنس تولید کننده آنزیم سرایشوپپتیداز از آب های برنج غرب مازندران

  • سال انتشار: 1392
  • محل انتشار: اولین همایش حفاظت از تالاب ها واکوسیستم های آبی
  • کد COI اختصاصی: PWAE01_058
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 988
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

راحله سلطانمرادی

دانشجو کارشناسی ارشد،گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و فناوری های نوین تهران

علی ناظمی

استادیار،گروه بیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد تنکابن

سیدرضا حسینی دوست

استاد تمام، گروه میکروبیولوژی، واحد علوم و فناوری های نوین تهران

چکیده

سراشیامارسیسنس یک باکتری گرم منفی روده ای است که قابلیت ترشح پروتئین به خارج سلول را دارا است. کشت گونه های سراشیا قادرند آنزیم سرایشوپپتیداز ) STP ( را تا حد زیادی در محیط انتخابی ترشح کنند. سرایشوپپتیداز نوعی آنزیم پروتئولیتیکاست و می تواند به عنوان یک جایگزین مناسب برای عوامل ضد التهابی غیر استروئیدی به کار رود. هدف از این مطالعه جداسازی سویه هایی از سراشیامارسیسنس با قابلیت تولید آنزیم سرایشوپپتیداز از آب های برنج غربمازندران بوده است. در این مطالعه 08 نمونه آب برنج از شالیزارهای مختلف غرب مازندران تحت شرایط استاندارد نمونه گیری شد. پس از تهیه رقتایزوله هایی با فعالیت پروتئازی بر روی محیط Skim milk agar شناسایی و جداسازی گردید. سپس ایزوله ها مورد ارزیابی ساختاری قرار گرفتند و از ایزوله های گرم منفی استخراج DNA به روش سیلیکا ژل صورت گرفت و با استفاده از پرایمراختصاصی ژن 16s rDNA گونه سراشیا مارسیسنس شناسایی گردید. به منظور تعیین توالی محصولات PCR به شرکت ماکروژن کره جنوبی فرستاده شد. ایزوله سراشیا مارسیسنس دارای هاله پروتئازی، مجددا در محیط براث حاوی منبع پروتئین کازئین کشت و پروتئاز ترشح شده، رسوب و تغلیظ گردید. رسوب تغلیظ شده آنزیم برای ارزیابی وزن ملکولی نسبی SDS-PAGE سنجش آنزیمی گردید.نتایج نشان داد که از میان 08 نمونه، 54 نمونه دارای هاله پروتئولتیک و گرم منفی بودند که با استفاده از تکنیک PCR اختصاصیتنها 1 ایزوله سراشیا مارسیسنس شناسایی گردید و نتیجه Sequensing همولوژی 79 % را نشان داد که نشان دهنده سویه جدیدی از باکتری بود. وزن ملکولی پروتئین ترشحی ایزوله N به طور تقریبی KDa 42 تعیین گردید

کلیدواژه ها

سراشیا مارسیسنس، غربالگری، 16s rDNA ، آنزیم سرایشوپپتیداز، وزن ملکولی

مقالات مرتبط جدید

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.