Efficient induction of embryogenic callus and biolistic-mediated transient transformation in the CP۵۷-۶۱۴ sugarcane cultivar (Saccharum officinarum L.)

  • سال انتشار: 1403
  • محل انتشار: فصلنامه ژنتیک و اصلاح نژاد ایران، دوره: 13، شماره: 1
  • کد COI اختصاصی: JR_IJGPB-13-1_001
  • زبان مقاله: انگلیسی
  • تعداد مشاهده: 146
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

سهیلا مطرودی

Department of Plant Molecular Biotechnology, National Institute of Genetic Engineering and Biotechnology (NIGEB), Tehran, Iran.

مصطفی مطلبی

Department of Plant Molecular Biotechnology, National Institute of Genetic Engineering and Biotechnology (NIGEB), Tehran, Iran.

امیر موسوی

Department of Plant Molecular Biotechnology, National Institute of Genetic Engineering and Biotechnology (NIGEB), Tehran, Iran.

عصمت جورابچی

Department of Plant Molecular Biotechnology, National Institute of Genetic Engineering and Biotechnology (NIGEB), Tehran, Iran.

چکیده

This study aimed to optimize embryogenic callus formation and transformation of the CP۵۷-۶۱۴ sugarcane variety using particle bombardment. Young leaf explants were cultured on modified Murashige and Skoog (MS) medium containing different concentrations of ۲,۴-dichlorophenoxyacetic acid (۲,۴-D; auxin) (۱, ۲, and ۴ mg L-۱) and two Dicamba concentrations (۴ and ۶ mg L-۱). The highest callus induction rate was achieved with ۲ mg L-۱ of ۲,۴-D. Subsequently, particle bombardment was used to introduce genetic constructs containing the uidA reporter gene driven by three promoters (CaMV۳۵S, ubiquitin, and actin۱) into the embryogenic calli. We assessed the impact of various biological, physical, and DNA parameters, including bombardment pressure, target distance, particle size, DNA amount, and osmotic pretreatment, through histochemical GUS assay to quantify blue spots. Results showed that the most effective combination involved bombardment at ۱۱۰۰ psi, ۶ cm target distance, ۱ μm gold particles coated with ۱ μg DNA, under a vacuum of ۲۵ inHg. Additionally, the best osmotic pretreatment utilized a solution containing ۰.۲ M sorbitol and ۰.۲ M mannitol. Notably, the construct driven by the ubiquitin promoter resulted in the highest transient expression of the uidA gene, suggesting its superiority for gene expression in this system.

کلیدواژه ها

calli, Gene expression, particle bombardment, Sugarcane

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.