مقایسه روش های PCR-RFLP ، مستقیم میکروسکوپی و کشتNNN در تشخیص لیشمانیوز جلدی

  • سال انتشار: 1392
  • محل انتشار: مجله دانشگاه علوم پزشکی خراسان شمالی، دوره: 5، شماره: 2
  • کد COI اختصاصی: JR_NKUMS-5-2_021
  • زبان مقاله: فارسی
  • تعداد مشاهده: 203
دانلود فایل این مقاله

نویسندگان

نوشین هاشمی

دانشگاه علوم پزشکی خراسان شمالی، بجنورد، ایران

سیدحسین حجازی

مرکز تحقیقات بیماری های پوستی و لیشمانیوز، گروه انگل و قارچ شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

میترا هاشمی

معاونت پژوهشی، دانشگاه علوم پزشکی خراسان شمالی، بجنورد، ایران

سیروس هاشمی

دانشگاه علوم پزشکی خراسان شمالی، بجنورد، ایران

محمد علی نیلفروش زاده

مرکز تحقیقات بیماری های پوست و سلول های بنیادی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران

چکیده

چکیده زمینه و هدف: لیشمانیوز، بیماری عفونی انگلی با انتشار وسیع در مناطق معتدله و گرمسیری است. با توجه به اینکه ارتقاء روش های تشخیص صحیح و سریع CL (Cutaneous Leishmaniasis) نقش به سزایی در کاهش عوارض بیماری به خصوص پیشگیری از بروز اسکارهای وسیع دارد، هدف از این مطالعه ارزیابی روش PCR-RFLP با پرایمرهای ITSRL و L۵.۸Sدر مقایسه با روش های مستقیم میکروسکوپی و کشت NNN برای تشخیص CL می باشد. مواد و روش کار: در این مطالعه از بین افراد دارای ضایعه ی جلدی مشکوک به CL،۶۰ بیمار با Leishmanin Skin Test (LST) مثبت انتخاب و از هر کدام سه نمونه جهت بررسی میکروسکوپی، کشت در محیط NNN وPCR–RFLP تهیه گردید. لام های رنگ آمیزی شده با لنز روغنی×۱۰۰ جهت مشاهده اشکال اماستیگوت انگل آزمایش شد. جهت کشت مقداری از مواد برداشت شده از حاشیه ضایعه بیمار به محیط NNN ، انتقال داده شد. پس از استخراجDNA با استفاده از روش PCR-RFLP تکثیر از توالی ITS۱ با پرایمرهای اختصاصی صورت گرفت و بعد از هضم باآنزیم HaeIII ایزوله ها درمقایسه با سویه های استاندارد تعیین گونه شد. داده ها با استفاده از آمار توصیفی و تست حساسیت با استفاده از نرم افزار SPSS۱۵ مورد تجزیه وتحلیل قرار گرفت. یافته ها: روش میکروسکوپی در ۳۶ مورد از ۶۰ بیمار (%۶۰) و نتایج کشت نمونه ها در محیط NNN در ۳۷ مورد (%۶۲) مثبت شد. در روش PCR-RFLP ۵۵ مورد (%۹۱)، با این روش مثبت و تعیین گونه شد. نتیجه گیری: با توجه به نتایج حاصل از این مطالعه و امکان تشخیص گونه ها با روش PCR-RFLP، فراهم نمودن امکانات استفاده از این تکنیک، همراه با روش مستقیم میکروسکوپی و کشت NNN در موارد لازم، در مراکز درمانی پیشنهاد می گردد.

کلیدواژه ها

Keyword: PCR-RFLP, direct microscopy, Cutaneous Leishmaniasis, culture, واژه های کلیدی:PCR-RFLP, مستقیم میکروسکوپی, کشت, لیشمانیوز جلدی

اطلاعات بیشتر در مورد COI

COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.

کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.