حمیده قاسم زادگان - مرکز تحقیقات انتقال خون موسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون
مجید شهابی - استادیار مرکز تحقیقات انتقال خون موسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون
نگار رضایی - استادیار مرکز تحقیقات بیماریهای غیر واگیر غدد و متابولیسم دانشگاه علوم پزشکی تهران
زهره شریفی - استاد مرکز تحقیقات انتقال خون موسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون

چکیده سابقه و هدف استان خراسان در ایران برای ویروسHTLV-۱  اندمیک است. با توجه به ناکارآمد بودن آزمایش های سرولوژیکی در شناسایی ویروس ها در دوره کمون، تایید جواب های نامشخص وسترن بلات و خطر انتقال ویروس HTLV-۱ از راه خون و فرآورده­های خونی، آزمایش Real – Time PCR به روش سایبرگرین راه اندازی شد. نمونه­های مورد آزمایش، مربوط به اهداکنندگان خون آلوده به این ویروس در پایگاه انتقال خون استان خراسان رضوی در سال ۱۳۹۶ بودند. مواد و روش ها در یک مطالعه تجربی، با استفاده از روش کلونینگ و رسم منحنی استاندارد، آزمایش Real - Time PCR برای تعیین پرووایرال لود راه اندازی شد. ابتدا  DNAژنومی از سلول های تک هسته ای خون محیطی استخراج شد. سپس محصول  PCR ژن Tax ، در یک وکتور کلونینگ قرار داده شد و با رقت سازی، منحنی استاندارد رسم و آزمایش Real – Time PCR با روش سایبرگرین راه اندازی شد. یافته ها با استفاده از محصول PCR برای ژن  Tax، وکتور pTZ۵۷/T و باکتریE.Coli  (سوش TG۱) کلونینگ انجام شد. صحت کلونینگ با Colony PCR و تعیین سکانس تایید شد. محصول کلونینگ به عنوان استاندارد آزمایش Real –Time PCR  استفاده شد و با رقت سازی، منحنی استاندارد رسم شد. شیب خط منحنی استاندارد ۳/۳ slope= و ۹۹/۰ = ۲R بوده که نشان­دهنده خطی بودن و کارآیی واکنش آزمایش می باشد. نتیجه گیری روش Real –Time PCR  جهت تعیین پرووایرال لود ویروس HTLV-۱ مناسب است.

Key words: HTLV-۱, Provirus, Real-Time PCR, ویروس HTLV-۱, پروویروس, Real Time PCR