Application of Rapid and Sensitive Real Time PCR Technique in Detection of DNA Impurities in Recombinant Interferon
- سال انتشار: 1393
- محل انتشار: مجله علوم پیشرفته زیست پزشکی، دوره: 4، شماره: 4
- کد COI اختصاصی: JR_JABS-4-4_003
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 174
نویسندگان
Cellular and Molecular Research Center, Faculty of Medicine, Qazvin University of Medical Sciences, Qazvin, Iran.
Cellular and Molecular Research Center, Faculty of Medicine, Qazvin University of Medical Sciences, Qazvin, Iran.
Molecular Medicine Department, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran.
چکیده
زمینه و هدف: اینترفرون ها خانواده ای از سایتوکاین ها هستند که در پاسخ ایمنی به عفونت های ویروسی نقش اساسی دارند. در جریان تولید اینترفرون نوترکیب در میزبان بیولوژیک، قطعاتی از اسیدنوکلئیک میزبان وارد محصول می شود. به علت وجود محدودیت های روش های قبلی در تشخیص این آلودگی ها، هدف از این مطالعه، استفاده از روش مولکولی سریع و حساس Real time PCR در این ناخالصی ها می باشد. مواد و روش ها: ابتدا با استخراج DNA از میزبان باکتریایی و تهیه رقت های متوالی از آن، واکنش Real time PCR به کمک رنگ SYBR Green I انجام گرفت و منحنی استاندارد رسم گردید. پس از استخراج DNA از اینترفرون و انجام واکنش PCR، میزان DNA به کمک منحنی استاندارد، تعیین گردید. نتایج: بررسی های انجام شده بر روی چند نمونه اینترفرون، میزان آلودگی DNA را حدود ۰۲/۰ پیکوگرم در هر دوز محصول نشان داد. همچنین پرایمرهای طراحی شده در واکنش فوق، هیچ گونه واکنشی با یکدیگر و سایر عوامل مداخله کننده نشان ندادند. نتیجه گیری: مطالعه فوق برای اولین بار در ایران بهینه سازی شد و نشان داد که تکنیک Real time PCR می تواند به عنوان یک روش کاربردی و بسیار دقیق در مراکز تولیدی جهت تشخیص ناخالصی های DNA ناشی از میزبان، در اینترفرون و سایر محصولات دارویی نوترکیب به کار برده شود.کلیدواژه ها
DNA impurities, Recombinant pharmaceutical products, Interferon, Real time PCR, SYBR Green I, ناخالصی DNA, محصولات دارویی نوترکیب, اینترفرون, Real time PCR, SYBR Green Iاطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.